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2.2动物细胞工程动物细胞培养动物细胞融合单克隆抗体技术核移植动物细胞工程常用技术其它动物细胞工程的基础2.2.1动物细胞培养和核移植技术阅读课本44-47动物细胞培养请尝试回答以下问题:1.什么是动物细胞培养?2.怎样进行动物细胞组织培养?3.动物细胞培养需要哪些条件?4.动物细胞培养有哪些方面的应用?什么是细胞贴壁?什么是贴附性细胞?怎样才有利于贴附性细胞的生长?什么是原代细胞?什么是传代细胞?什么是接触抑制,怎样解除接触抑制?一、动物细胞培养的应用和概念:1、概念:动物细胞培养就是从动物有机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后,放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖.2、原理:细胞增殖3、总结:动物细胞培养过程动物胚胎或幼龄动物的组织、器官配置细胞悬液剪碎用胰蛋白酶处理10代细胞转入培养瓶40-50代细胞传代培养无限传代单个细胞加培养液稀释传代10代以内,遗传物质不改变,保持正常二倍体核型。传代10-50代左右,增长缓慢以至于完全停止,部分细胞核型可能发生变化(遗传物质可能改变)为什么用胰蛋白酶处理?分瓶传代培养原代培养特点:细胞贴壁、接触抑制继续传代培养少部分细胞获得不死性,细胞突变,遗传物质已经改变,等同于癌细胞。原代培养强调一:细胞贴壁过程■细胞贴壁:在培养瓶悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上,称为细胞贴壁。■培养瓶或培养皿壁要求:表面光滑、无毒、易于帖附。■当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞就会停止分裂增殖,这种现象称为细胞的接触抑制。强调二:接触抑制有关概念原代培养:动物细胞组织消化后的初次培养称为原代培养。一般培养的代数为10代之内。传代培养:将原代细胞从培养瓶中取出,配制成细胞悬浮液,分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养,称为传代培养。传代细胞一般传至10代就不易传下去了。少数可传至50代(寿命极限),其中有一些可获得不死性无限增殖(突变成癌细胞)。▲细胞株:传代细胞一般能传到40-50代,遗传物质一般不会发生改变,叫细胞株。强调:细胞系、细胞株(了解即可,老课本体系)▲细胞系:传代50代以后不能再传下去,部分细胞遗传物质发生了改变,能连续传代,获得不死性,叫细胞系。多细胞动物和人体的细胞都生活在内环境中,根据你所学的内环境的知识,思考并讨论以下问题:讨论1.体外培养细胞时需要提供哪些物质2.体外培养的细胞需要什么样的环境条件?充足的营养供给、适宜的温度、适宜的pH和气体环境无菌、无毒的环境。3、温度和pH温度36.5+(-)0.5度,pH7.2-7.44、气体环境O2和CO2(95%空气和5%CO2)培养条件:1、无菌、无毒的环境(添加一定量的抗生素,定期更换培养液)2、营养(糖(葡萄糖)、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素、维生素、血清、血浆等。合成培养基)大规模培养生产生物制品(病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体)作为基因工程中的受体细胞培养的动物细胞可以用于检测有毒物质,判断某种物质的毒性用于生理、病理等方面的研究(如筛选抗癌药物为治疗和预防癌症及其他疾病提供理论依据)应用:动物细胞培养定义:概念:就是从动物机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后,放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖。植物组织培养在无菌和人工控制的条件下,将离体的植物器官、组织、细胞,培养在人工控制的培养基上,给予适宜的培养条件,诱导其产生愈伤组织、丛芽,最终形成完整的植株。细胞的全能性细胞株、细胞系植物体培养结果获得细胞或细胞产物快速繁殖、培育无病毒植株等培养目的葡萄糖、血清、血浆蔗糖、植物激素培养基特有成分液体培养基固体培养基培养基性质细胞增殖原理动物细胞培养植物组织培养比较项目植物细胞和动物细胞培养的比较1、植物组织培养过程将组织分散成单个细胞的吗?2、动物细胞培养过程将组织分散成单个细胞的吗?3、为何动物细胞培养过程将组织分散成单个细胞的呢?4、如何将动物组织分散成单个的细胞呢?没有是成块的组织细胞靠在一起,彼此限制了细胞的生长和增殖先用剪刀剪碎,后用蛋白酶处理。思考题1、在动物细胞培养过程中遗传物质发生改变的细胞是-----------------...

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