限时集训(四十三)微生物的培养与应用(限时30分钟满分60分)二、非选择题(共60分)1.(15分)下面是分离分解尿素的细菌所用的培养基,据表回答下列问题:KH2PO4Na2HPO4MgSO4·7H2O葡萄糖尿素琼脂自来水1.4g2.1g0.3g10.0g1.0g15.0g定容至1000mL(1)该培养基中含有的最主要碳源是________。(2)该培养基按物理性质划分,属于________培养基。(3)在该培养基中,可以通过检测pH的变化来判断尿素是否被分解,所依据的原理是________________________________________________________________________________________________,所用方法是在培养基中加入________,若尿素被分解,则培养基变成________色。(4)如果将此培养基改为用来分离分解纤维素的微生物的培养基,则主要提供碳元素的物质应改为________。2.(15分)某学校打算开辟一块食用菌栽培基地,以丰富学生的劳动技术课内容。首先对食用菌实验室进行清扫和消毒处理,准备食用菌栽培所需的各种原料和用具,然后从菌种站购来各种食用菌菌种。请回答下列问题:(1)对买回来的菌种进行扩大培养,首先制备试管培养基,写出制备固体牛肉膏蛋白胨培养基所需的原料:________、________、________、________、________。其中提供氮源的是________________________;提供碳源的主要物质是________________________。(2)微生物在生长过程中对各种成分所需量不同,配制培养基时各成分要有合适的________________。在烧杯中加入琼脂后要不停地________,防止______________________。(3)将配制好的培养基分装到试管中,加棉塞后若干个试管一捆,包上牛皮纸并用皮筋勒紧放入________中灭菌,压力________kPa,温度________,时间________。灭菌完毕拔掉电源,待锅内压力自然降到0时,将试管取出。如果棉塞上沾有培养基,此试管应__________。(4)使用高压蒸汽灭菌锅时注意,先向锅内倒入______。把锅内水加热煮沸并将其中原有冷空气彻底排出后将锅密闭。(5)从一支试管向另一支试管接种时注意,接种环要在酒精灯____________(“内”或“外”)焰灭菌,并且待接种环____________后蘸取菌种,试管口不能离开酒精灯火焰附近,将接种的试管在适温下培养,长成菌落后放入________℃冰箱中保藏。3.(15分)(2013·青岛质检)微生物与人类关系密切。虽然有些微生物能使动植物患病,但多数微生物对人类是有益的。请回答下列问题:(1)培养微生物的培养基配方中一般含有水、碳源、氮源和无机盐。从土壤中分离分解尿素的细菌时,培养基中加的唯一氮源为________________________,这种培养基称为____________________培养基。(2)在制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的倒平板操作时,平板冷凝后,为什么要将平板倒置?________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(3)微生物接种的方法很多,最常用的是平板划线法和________________法。在用平板1划线法接种时,为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环?________________________________________________________________________________________________________________________________________________。在划线操作结束时,仍然需要灼烧接种环吗?为什么?________________________________________________________________________。4.(15分)下面是探究如何从土壤中分离自生固氮菌与计数的实验,完成下列问题:(1)实验原理:农田的表层土壤中,自生固氮菌的含量比较多。将用表层土制成的稀泥浆,接种到无氮培养基上进行培养。在这种情况下,只有自生固氮菌才能生长繁殖。用这种方法,可以将自生固氮菌与其他细菌分离开来。材料用具:农田的表层土壤、无氮培养基、牛肉膏蛋白胨培养基,盛9mL无菌水的试管、无菌吸管、无菌涂布器、无菌培养皿、盛90mL无菌水的锥形瓶、恒温箱。(2)方法步骤:①倒平板:分别将无菌培养基、牛肉膏蛋白胨培养基倒平板,操作过程应在火焰旁。②制备土壤稀释液:取土样10g加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中,充分摇匀。用无菌吸管吸取上清液1mL,转至9mL的无菌水的大试...