教学目标:1、知道纤维素酶的种类及作用2、初步掌握从土壤中分离出分解纤维素的微生物的实验方法阅读课本27页基础知识1、纤维素在生物圈的分布状况？2、纤维素酶的组成及作用？纤维素是地球上含量最丰富的类物质。植物的根、茎、叶等器官都含有大量的纤维素。其中是自然界中纤维素含量最高的天然产物。纤维素酶是一种酶，一般认为它至少包括三种组分，即、和，前两种酶使纤维素分解成，第三种酶将纤维二糖分解成。一、纤维素和纤维素酶酶筛选操作结果延伸阅读课本27页基础知识1、纤维素在生物圈的分布状况？2、纤维素酶的组成及作用？纤维素是地球上含量最丰富的多糖类物质。植物的根、茎、叶等器官都含有大量的纤维素。其中棉花是自然界中纤维素含量最高的天然产物。纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即CX酶、C1酶和葡萄糖苷酶，前两种酶使纤维素分解成纤维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。一、纤维素和纤维素酶二、纤维素分解菌的筛选1、纤维素分解菌的筛选方法2、纤维素分解菌的筛选方法的原理染色法：这种方法能够通过颜色反应直接对微生物进行.刚果红是一种染料，它可以与形成红色复合物，但并不和、发生这种反应。当纤维素被纤维素酶分解后,刚果红—纤维素的复合物就无法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的。这样我们可以通过是否产生透明圈来筛选.酶筛选操作结果延伸二、纤维素分解菌的筛选1、纤维素分解菌的筛选方法2、纤维素分解菌的筛选方法的原理刚果红染色法：这种方法能够通过颜色反应直接对微生物进行筛选.刚果红是一种染料，它可以与纤维素形成红色复合物，但并不和纤维二糖、葡萄糖发生这种反应。当纤维素被纤维素酶分解后,刚果红—纤维素的复合物就无法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的。这样我们可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌透明圈三、实验操作土壤取样选择培养梯度稀释将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上挑选产生透明圈的菌落单菌落挑取法土壤取样取样的环境是怎样的，作出这种选择的理由是什么？选择纤维素丰富的环境，如树林中多年落叶形成的腐殖土，多年积累的枯枝败叶等等。生物与环境的互相依存关系，在富含纤维素的环境中纤维素分解菌的含量相对提高，因此从这种土壤中获得目的微生物的几率要高于普通环境酶筛选操作结果延伸三、实验操作土壤取样选择培养梯度稀释将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上挑选产生透明圈的菌落单菌落挑取法选择培养基纤维素分解菌的选择培养基纤维素粉5gNaNO31gNa2HPO4·7H2O0.5gKH2PO40.9gMgSO4·7H2O0.5gKCl0.5g酵母膏0.5g水解酪素0.5g将上述物质溶解后,用蒸馏水定容到1000ml选择培养1、选择培养的目的：增加纤维素分解菌的浓度，以确保能够从样品中分离到所需要的微生物(富集培养，浓缩）2、制备选择培养基课本29页旁栏中的比例配置，回答下列问题a、旁栏中的配方是液体培养基还是固体培养基？为什么？b、这个培养基对微生物是否具有选择作用？如果具有，是如何进行选择的？c、你能否设计一个对照实验，说明选择培养基的作用是液体培养基，原因是配方中无凝固剂有选择作用，本配方中的碳源是纤维素，所以能分解纤维素的微生物可以大量繁殖用牛肉膏蛋白胨培养基与之对照3、操作方法：将土样加入装有30ml选择培养基的锥形瓶中，将锥形瓶固定在摇床上，在一定温度下震荡培养1～2天，直至培养液变浑浊。也可重复选择培养.吸取适量的培养液，稀释涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上酶筛选操作结果延伸三、实验操作土壤取样选择培养梯度稀释将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上挑选产生透明圈的菌落梯度稀释用移液管从富集培养土壤液(选择培养后的培养基)中吸取1ml加入盛有9ml无菌水的试管中充分混匀。然后换枪头从此试管中吸取1ml加入另一盛有9ml无菌水的试管中，混合均匀，以此类推制成10-1,10-2,10-3,10-4,10-5,10-6不同稀释度的溶液。稀释最大倍数到106将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上1、制备培养基:2、涂布平板：将稀释度为104～106的菌悬液各取0.1ml涂布在培养基上，30℃倒置培养下：鉴别纤维素分解菌的培养基CMC-Na5-10g酵母膏1gKH2PO40.25...
