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主要用于制备单克隆抗体获得杂种植株主要用途物理、化学方法（同左）灭活的病毒物理（离心、振动、电刺激）化学（聚乙二醇）诱导方法使细胞分散后诱导细胞融合去除细胞壁后诱导原生质体融合形成杂种细胞，再经组织培养形成杂种植株，步骤细胞膜的流动性细胞膜的流动性、植物细胞全能性原理动物细胞融合植物体细胞杂交比较项目植物体细胞杂交与动物细胞融合的比较强调：强调：效应效应BB细胞是能细胞是能够产生抗体的够产生抗体的BB淋巴细淋巴细胞，下文将其简称为胞，下文将其简称为BB淋巴细胞淋巴细胞抗体：能够与抗原发生特异性结合的免疫球蛋白。1.1.抗体是什么？抗体是什么？2.2.抗体如何产生？抗体如何产生？3.3.抗体主要分布在哪里？抗体主要分布在哪里？能产生抗体的细胞是浆细胞（即效应B细胞）。4.4.如果一个农夫被毒蛇如果一个农夫被毒蛇咬了，如何获得相应的咬了，如何获得相应的抗体来治疗？抗体来治疗？抗体的传统生产方法抗原反复注射从动物的血清中分离抗体该法制备抗体的缺点：产量低、纯度低，且抗体的特异性差、灵敏度低。单克隆抗体！单克隆抗体！2.1单克隆抗体的定义：克隆单个B淋巴细胞其所产生的化学性质单一、特异性强的抗体称为单克隆抗体。•单：单个B淋巴细胞•克隆：该细胞大量增殖为相同的细胞群•抗体：该细胞群产生的特异性抗体。二、单克隆抗体二、单克隆抗体一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体骨髓瘤细胞能无限增殖杂交瘤细胞动物细胞培养技术设计方案：动物细胞融合技术单克隆抗体既能迅速大量增殖，又能的产生专一抗体19751975年英国科学家年英国科学家米尔斯坦米尔斯坦和和柯勒柯勒的实验的实验活动二：阅读课本P53-54思考与讨论:•1.为什么要对小鼠进行注射特定的抗原？•2.选择了哪两种细胞进行细胞融合？•3.为什么选这两种细胞？•4.细胞融合后获得几种类型的融合细胞？•5.有几种杂交瘤细胞？•6.两次筛选的目的？•7.如何大量生产单克隆抗体？2.2单克隆抗体的制备过程机会只对进取有为的人开放机会只对进取有为的人开放,,庸人永远无法光顾！庸人永远无法光顾！用抗原免疫小鼠骨髓瘤细胞的培养B淋巴细胞骨髓瘤细胞融合多种细胞获得产生相应抗体的B细胞产生专一抗体产生专一抗体无限增殖无限增殖BB、B瘤、瘤瘤（B、瘤）机会只对进取有为的人开放机会只对进取有为的人开放,,庸人永远无法光顾！庸人永远无法光顾！由于培养基中缺乏相应的营养物，骨髓瘤细胞死亡B淋巴细胞培养几天后死亡杂交瘤细胞置于选择性培养基上培养（一选）选择性培养基：只有杂交瘤细胞才能存活杂交瘤细胞特点：杂交瘤细胞特点：既能产生特异性抗体，又能大量增殖。既能产生特异性抗体，又能大量增殖。机会只对进取有为的人开放机会只对进取有为的人开放,,庸人永远无法光顾！庸人永远无法光顾！多孔细胞培养板阳性克隆的筛选和克隆化培养用培养液稀释（二选）：选能产生所需专一抗体的杂交瘤细胞机会只对进取有为的人开放机会只对进取有为的人开放,,庸人永远无法光顾！庸人永远无法光顾！机会只对进取有为的人开放机会只对进取有为的人开放,,庸人永远无法光顾！庸人永远无法光顾！机会只对进取有为的人开放机会只对进取有为的人开放,,庸人永远无法光顾！庸人永远无法光顾！机会只对进取有为的人开放机会只对进取有为的人开放,,庸人永远无法光顾！庸人永远无法光顾！注射到小鼠体内体外培养由单个杂交瘤细胞通过克隆，所产生的化学性质单一、特异性强的抗体。单克隆抗体活动三、用以下文字和箭头来构建单克隆抗体的制备过程小鼠、注射特定抗原、已免疫的B淋巴细胞、骨髓瘤细胞、BB细胞，B瘤细胞，瘤瘤细胞、杂交瘤细胞、产生专一抗体的杂交瘤细胞、体外培养、体内培养、单克隆抗体、融合、筛选过程：过程：BB淋巴细胞淋巴细胞骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞融合融合B-BB-B细胞细胞B-B-瘤细瘤细胞胞瘤瘤--瘤细胞瘤细胞选择性选择性培养基培养基筛选筛选杂交瘤细胞杂交瘤细胞（（B-B-瘤细瘤细胞）胞）克隆化培养克隆化培养专一抗体专一抗体检验阳性检验阳性产生专一抗产生专一抗体的杂交瘤体的杂交瘤细胞（群）细胞（群）体外培养体外培养体内培养体内培养单克隆抗体单克隆抗体瘤细...