1.2 基因工程的基本操作程序1 、目的基因的获取2 、基因表达载体的构建3 、将目的基因导入受体细胞4 、目的基因的检测与鉴定基因工程基本操作的四个步骤一、目的基因的获取( 一 ) 目的基因主要是 ______________________,也可是一些具有调控作用的因子。目的基因的获取方法主要有 ____________ 和 ___________ 两大类编码蛋白质的基因（二）获取目的基因的常用方法有哪些 ?1 、从基因文库中获取2 、利用 PCR 技术扩增3 、人工合成法（反转录法和化学合成法）如：与生物抗性相关的基因、与优良品质相关的基因、与生物药物和保健品相关的基因、与毒物降解相关的基因、与工业用酶相关的基因等。直接分离法人工合成法1 、从基因文库中获取目的基因（ 1 ）基因文库 将含有某种生物不同基因的许多 DNA 片断，导入到受体菌的群体中，各个受体菌分别含有这种生物的不同基因，称为基因文库。种类基因组文库：含有一种生物的全部基因部分基因文库：只包含了一种生物的部分基因， 如： cDNA 文库1 、原核细胞基因结构：基因非编码区：非编码区：调控序列编码区：编码蛋白质终止子：终止转录启动子：启动转录， RNA聚合酶结合识别位点mRNA翻译特定功能的蛋白质转录特点： 编码区是连续的，非编码区起调控作用DNA 分子2 ：真核细胞基因结构：基因非编码区：非编码区：编码区：编码蛋白质终止子启动子前体 mRNA外显子和内含子都转录特点：编码区间隔不连续！分为内含子和外显子。编码蛋白质不编码蛋白质剪切掉内含子转录的部分mRNADNA 分子提取某种生物的全部 DNA适当的限制酶一定大小的 DNA 片段将 DNA 片段与载体连接重组 DNA 分子基因组文库导入受体菌（ 2 ）基因文库的构建方法① 基因组文库的构建有启动子和内含子提取某生物特定发育时期的 mRNA单链 DNA双链 cDNA 片段重组载体与载体连接cDNA 文库逆转录酶DNA 聚合酶导入受体菌② cDNA 文库的构建 ----- 逆转录法： 部分基因：基因的选择性表达无启动子和内含子 真核生物的基因用逆转录法得到的 cDNA 与原基因相同吗？有哪些差异？原核生物基因呢？思考？真核生物：无非编码区和内含子原核生物：无非编码区（ 3 ）构建基因文库的目的 怎样从基因文库中得到我们所需的目的基因呢 ? 便于在不知道目的基因核苷酸序列的情况下，获得所需的目的基因。依据：目的基因的有关信息。如：根据基因的核苷酸序列 基因的功能 基因在染色体上的位置 ...
