第一章基因工程基因工程是狭义的遗传工程,遗传工程的核心 是构建重组 DNA分子
基因工程 也称为 “重组 DNA技术”
第一节 工具酶的发现和基因工程的诞生基因工程的理论基础 :DNA是遗传物质, DNA的双螺旋结构,以及遗传信息的传递方式
基因工程的技术保障: 限制性核酸内切酶, DNA连接酶和质粒载体发现与应用
一、限制性核酸内切酶: 能够识别和切割 DNA分子内一小段特殊核苷酸序列的酶
(平末端和黏性末端)限制性核酸内切酶可作为切割DNA分子的手术刀,它的发现和应用,使DNA重组成为可能
二、DNA连接酶: 将具有末端碱基互补的2 个 DNA片段连接在一起,形成的DNA分子称为重组 DNA分子
DNA连接酶具有缝合DNA片段的作用
三、质粒: 能够自主复制的双链环状DNA分子,它们在细菌中以独立于大型DNA分子之外的方式存在,是一种特殊的遗传物质
最常用的是大肠杆菌的质粒,其含有抗生素抗性基因
标志基因工程诞生的试验:通过重组,使大肠杆菌同时具有四环素和卡那霉素的抗性
四、基因工程的载体载体是运载外源DNA进入宿主细胞的车子,即运载工具
除质粒外,基因工程载体还有 入噬菌体、植物病毒和动物病毒
入噬菌体: 将外源基因载入大肠杆菌等宿主细胞
植物病毒: 将外源基因带入植物细胞
动物病毒: 将外源基因带入动物细胞
第二节 基因工程的原理和技术基因工程的 基本原理 是让人们感趣的基因(目的基因)在宿主细胞中稳定和高效表达
基因工程的 基本要素 :工具酶、目的基因、载体和宿主细胞
基因工程的 基本操作步骤: A目的基因的获得; B重组 DNA的形成; C重组 DNA导入受体细胞(宿主细胞) ;D筛选含有目的基因的受体细胞;E目的基因的表达
一、获得目的基因目的基因序列已知: 化学合成方法合成目的基因,PCR扩增目的基因
目的基因序列未知: 构建基因文库
二、形成重组 D