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1 第一个要给大家讲的， 是它这个 flowcell 。Flowcell 翻成中文，就叫“流动池”。我们来看这个图片。 图片当中， 我们看到一个象载玻片大小的芯片。这个芯片里面，是做了 8 条通道。 在这个通道的内表面，是做了专门的化学修饰。它的化学修饰，主要是用 2 种 DNA 引物，把它（ 2 种 DNA 引物）种在玻璃表面。这两种（ DNA 引物的）序列是和接下来要测序的DNA 文库的接头序列相互补的。而且这 2 种引物是通过共价键，连到Flowcell 上去。之所以要用共价键连到 Flowcell 上去，是因为接下来有大量的液体要流过这个Flowcell ，只有有共价键连接的这些 DNA ，才不会被冲掉。这就是Flowcell 。文库制作再接下来，讲一下文库、和文库的制作（过程）所谓的 DNA 文库，实际上是许多个DNA 片段，在两头接上了特定的DNA 接头，型成的 DNA 混合物。文库有 2 个特点，第 1 个特点，是当中这一段插入的DNA ，它的序列是各种各样的。第 2 个特点，它的两头的接头序列， 是已知的，而且是人工特地加上去的。要做这个文库，首先是把基因组DNA ，用超声波打断。然后打断之后，两头用酶把它补平，再用 Klenow 酶在 3’端加上一个 A 碱基。然后，再用连接酶把这个接头给连上去。连好了接头的 DNA 混合物，我们就称为一个 “文库”。英文也称作 “library ”。桥式 PCR做好了 Library 之后，就要做桥式PCR 了。桥式 PCR，实际上是把文库种到芯片上去，然后进行扩增，这样的一个过程。这个过程，首先是把文库加入到芯片上，因为文库两头的DNA 序列，和芯片上引物是互补的，所以，就会产生互补杂交。2 杂交完了之后，我们在这里面加入dNP 和聚合酶。聚合酶会从引物开始，延着模板合成出一条全新的DNA 链来。新的这条链，和原来的序列是完全互补的。接下来，我们再加入NaOH 碱溶液。 DNA 双链在 NaOH 碱溶液存在下，就解链了。而且被液流一冲，原来的那个（模板）链，也就是没有和芯片共价连接的链，就被冲走了。而和芯片共价连接的链，就被保留下来。然后，我们再在液流池里加入中性液体，主要是为了中和这个碱液， 在加入中和液之后，整个环境变成中性了。这时侯，DNA 链上的另外一端，就会和玻璃板上的第二种引物，发生互补杂交。接下来，我们加入酶和dNTP ，聚合酶就延着第二个引物，合成出一条新链来；然后，我们再加碱， 把 2 条链解链解开； 然后，我们再加中和液， 这时侯， DNA...