第 1 页 共 6 页 细菌的生化实验 各种细菌具有各自独特的酶系统,因而对底物的分解力量不同,其代谢产物也不同.用生物化学方法测定这些代谢产物,可用来区分和鉴定细菌的种类.利用生物化学方法来鉴别不同细菌,称为细菌的生物化学试验或称生化反应.生物化学试验的方法许多,这里主要介绍碳水化合物的代谢试验 1．糖(醇、苷)类发酵试验 (1)原理:不同种类细菌含有发酵不同糖(醇、苷)类的酶,因而对各种糖(醇、苷)类的代谢力量也有所不同,即使能分解某种糖(醇、苷)类,其代谢产物可因菌种而异.检查细菌对培育基中所含糖(醇、苷)降解后产酸或产酸产气的力量,可用以鉴定细菌种类. (2)方法:在基础培育基中(如酚红肉汤基础培育基pH7.4) 加入0.5~1.0％(w/v) 的特定糖(醇、苷)类.所使用的糖(醇、苷)类有许多种,依据不同需要可选择单糖、多糖或低聚糖、多元醇和环醇等,见表6-4-1.将待鉴定的纯培育细菌接种入试验培育基中,置35℃孵育箱内孵育数小时到两周(视方法及菌种而定)后,观看结果.若用微量发酵管,或要求培育时间较长时,应留意保持其四周的湿度,以免培育基干燥. (3)结果:能分解糖(醇、苷)产酸的细菌,培育基中的指示剂呈酸性反应(如酚红变 为黄 色 ),产气的细菌可在小倒 管(Durham小管)中产生气泡 ,固 体 培育基则 产生裂 隙 .不分解糖则 无 变 化. (4)应用:糖(醇、苷)类发酵试验,是 鉴定细菌的生化反应试验中最主要的试验,不同细菌可发酵不同的糖(醇、苷)类,如沙 门 菌可发酵细 菌 的 生 化 实 验 --第 1页细 菌 的 生 化 实 验 --第 1页 第 2 页 共 6 页 葡萄糖,但不能发酵乳糖,大肠埃希菌则可发酵葡萄糖和乳糖.即便是两种细菌均可发酵同一种糖类,其发酵结果也不尽相同,如志贺菌和大肠埃希菌均可发酵葡萄糖,但前者仅产酸,而后者则产酸、产气,故可利用此试验鉴别细菌. 单糖 四碳糖:赤藓糖 , 五碳糖:核糖 核酮糖 木糖 阿拉伯糖, 六碳糖:葡萄糖 果糖 半乳糖 甘露糖 双糖 蔗糖(葡萄糖＋果糖) 乳糖(葡萄糖＋半乳糖) 麦芽糖(两分子葡萄糖) 三糖 棉子糖(葡萄糖＋果糖＋半乳糖) 多糖 菊糖(多分子果糖) 淀粉 醇类 侧金盏花醇 卫茅醇 甘露醇 山梨醇 非糖类 肌醇 2．葡萄糖代谢类型鉴别试验 (1)原理:细菌在分解葡萄糖的过程中,必需有分子氧参与的,称为氧化型;能进行无氧降解的为发酵型;不分解葡萄糖的细菌为产碱型.发酵型细菌无论在有氧或无氧环境中都能分解葡萄糖,而氧化型细菌在无氧...
