第一章 基因工程 基因工程是狭义的遗传工程，遗传工程的核心是构建重组DNA 分子。 基因工程也称为“重组DNA 技术”。 第一节 工具酶的发现和基因工程的诞生 基因工程的理论基础：DNA 是遗传物质，DNA 的双螺旋结构，以及遗传信息的传递方式。 基因工程的技术保障：限制性核酸内切酶，DNA 连接酶和质粒载体发现与应用。 一、限制性核酸内切酶：能够识别和切割 DNA 分子内一小段特殊核苷酸序列的酶。（平末端和黏性末端） 限制性核酸内切酶可作为切割 DNA 分子的手术刀，它的发现和应用，使 DNA 重组成为可能。 二、DNA 连接酶：将具有末端碱基互补的2 个 DNA 片段连接在一起，形成的DNA 分子称为重组DNA 分子。DNA 连接酶具有缝合 DNA 片段的作用。 三、质粒：能够自主复制的双链环状 DNA 分子，它们在细菌中以独立于大型 DNA 分子之外的方式存在，是一种特殊的遗传物质。最常用的是大肠杆菌的质粒，其含有抗生素抗性基因。 标志基因工程诞生的试验：通过重组，使大肠杆菌同时具有四环素和卡那霉素的抗性。 四、基因工程的载体 载体是运载外源DNA 进入宿主细胞的车子，即运载工具。除质粒外，基因工程载体还有 入噬 菌体、植 物病 毒 和动 物病 毒 。 入噬 菌体：将外源基因载入大肠杆菌等 宿主细胞。 植 物病 毒 ：将外源基因带 入植 物细胞。 动 物病 毒 ：将外源基因带 入动 物细胞。 第二节 基因工程的原 理和技术 基因工程的基本 原 理是让 人 们感 趣 的基因（目 的基因）在宿主细胞中稳 定 和高 效 表达 。 基因工程的基本 要 素：工具酶、目 的基因、载体和宿主细胞。 基因工程的基本 操 作步 骤 ：A 目 的基因的获 得 ； B 重组DNA 的形成； C 重组DNA 导 入受 体细胞（宿主细胞）； D 筛 选 含有目 的基因的受 体细胞； E 目 的基因的表 达 。 一、获 得 目 的基因 目 的基因序列已 知 ：化 学 合成方法 合成目 的基因，PCR 扩 增 目 的基因。 目 的基因序列未 知 ：构建基因文 库 。 二、形成重组DNA 分子 用相 同的限制性核酸内切酶分别切割目 的基因和载体，两 者 形成相 同的黏性末端，然 后 用 DNA 连接酶将目 的基因和载体连接在一起，形成重组DNA 分子。 三、将重组DNA 分子导 入受 体细胞 受 体细胞：大肠杆菌，枯 草 杆菌，酵 母 菌和动 植 物细胞等 。 质...
