自动化分析免疫比浊VIP专享VIP免费

临床免疫学检验吉林医药学院检验学院免疫检验自动化分析仪免疫比浊分析的临床应用免疫比浊分析的临床应用如免疫球蛋白IgG、IgA、IgM、；补体C3、C4；血浆蛋白AAT、TRF、A1M、CER、HPT、PAB、ALB；炎性反应蛋白SAA、CRP；载脂蛋白APO、ABI；尿蛋白系列小分子治疗药物检范围测血浆、体液中特种蛋白概括：免疫比浊测定原理，以及影响免疫比浊的因素。原理：免疫当可溶性抗原与相应抗体特异结合，二者比例合适时，在特殊的缓冲液中它们快速形成一定大小的抗原抗体复合物，使反应液体出现浊度。利用现代光学测量仪器对浊度进行测定从而检测抗原含量。影响因素：抗原抗体的比例，反应体系中保持抗体过量；抗体的质量，要选择特异性强、效价高、亲和力强的多抗；抗原抗体反应的溶液，合适的PH（6.5～8.5）和离子强度；使用增浊剂可增强检测信号。免疫比浊分析技术发展自动化免疫比浊自动化免疫比浊两个阶段测定抗原抗体形成后的阶段测定抗原抗体形成后的阶段散射散射((终点终点))比浊比浊测定抗原抗体结合的峰值测定抗原抗体结合的峰值速率速率散射比浊散射比浊免疫比浊法分类当一束光当一束光线通过溶线通过溶液受到光液受到光散射和光散射和光吸收两个吸收两个因素的影因素的影响而使光响而使光的强度减的强度减弱弱透射比浊法透射比浊法::在光源的光路方向（在光源的光路方向（0000））测量透射光强度和被检测测量透射光强度和被检测溶液微粒浓度关系的方法。溶液微粒浓度关系的方法。散射比浊法散射比浊法::在光源的光路方向（在光源的光路方向（550-0-969600））角的方向上测量透射光强度角的方向上测量透射光强度和被检测溶液中微粒浓度关和被检测溶液中微粒浓度关系的方法。系的方法。一、散射免疫比浊分析原理散射比浊法：在液相中可溶性抗原、抗体特异性结合，形成一定大小的复合物粒子，当入射光沿水平轴照射在粒子颗粒上时，光线被颗粒吸收或折射，发生偏转.散射光的强度与复合物的含量成正比，即待测抗原越多，形成的复合物越多，散射光就越强。影响散射信号的因素影响散射信号的因素((了解了解))如入射光的波长、偏振、如入射光的波长、偏振、微粒大小、浓度、质量、微粒大小、浓度、质量、以及检测点的距离。以及检测点的距离。颗粒直径颗粒直径比比入射光波入射光波长长小小的多，的多，散射光的分布比较均匀。散射光的分布比较均匀。颗粒直径接近入射光的波长，颗粒直径接近入射光的波长，其散射光的分布呈明显不均匀其散射光的分布呈明显不均匀RayleighRayleigh散射散射MileMile散射散射（一）散射颗粒与散射光（一）散射颗粒与散射光RayleighRayleigh原理原理：即散射光的强度与复合物的量：即散射光的强度与复合物的量呈正比，与散射光的夹角呈正比，与波长呈反呈正比，与散射光的夹角呈正比，与波长呈反比。比。在散射比浊中，在散射比浊中，增加增加抗原抗原--抗体复合物的抗体复合物的体积体积，，减小减小入射光的波长入射光的波长，，扩大扩大散射光夹角散射光夹角等等因素，均可增加检测的敏感度。因素，均可增加检测的敏感度。（二）反应物含量与散射浊度（二）反应物含量与散射浊度HeidelbergerHeidelberger曲线曲线即当抗体量恒定时，形成的抗原抗体复合物的反应与散射即当抗体量恒定时，形成的抗原抗体复合物的反应与散射信号响应值的上升呈正比。同时，散射信号随抗原抗体信号响应值的上升呈正比。同时，散射信号随抗原抗体反应时间增加而曲线上升。反应时间增加而曲线上升。当抗原量与响应值上升到一极限时，再增加抗原量，当抗原量与响应值上升到一极限时，再增加抗原量，使散射响应值迅速下降使散射响应值迅速下降散射比浊测定时，散射比浊测定时，一定要保证一定要保证抗体过量抗体过量。。二、定时散射比浊分析二、定时散射比浊分析（一）基本原理1.是将沉淀反应与散射比浊分析相结合，“在抗原抗体反应几秒钟后开始测定峰值信号”。2.目的是排除抗原抗体反应的不稳定性，降低检测误差。3.3.采用抗体过量，以获得颗粒产生的最强的散射光信号。采用抗体过量，以获得颗粒产生的最强的散射光信号。时间检测分两个在预反应时段，加小量样本与抗体反...