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实验一微生物培养基的配制和灭菌培养基是将微生物生长繁殖所需要的各种营养物质，用人工方法配制而成的各种营养基质。它具有微生物正常生活所需的各种养料和适宜的环境条件：(1) 适当组分和比例的营养物质； (2) 适宜的 pH 值；(3) 合适的渗透压； (4) 保持无菌状态。 所以培养基是培养微生物所必需的最主要材料。培养基的配制是微生物工作者的主要技术操作之一。一、实验目的与耍求： 1．了解培养基的配制原理和方法，掌握其配制过程。 2．了解几种灭菌方法，掌握干热灭菌法和加压蒸汽灭菌法的原理及其使用方法。3．熟悉分离、培养微生物前的有关准备工作及操作方法。二、实验原理与材料： (一) 培养基的种类根据培养基的组成成分，可将培养基分为三类：合成培养基： 由各种纯化学物质按一定比例配制而成。半合成培养基：由一部分纯化学物质和另一部分天然物质配制而成。天然培养基：利用天然来源的有机物配制而成的。从培养基的物理状态来分：液体培养基：不加凝固剂。固体培养基：在液体培养基中加2％左右的凝固剂。半固体培养基：在液体培养基中加入0.2 ％一 0.5 ％凝固剂。微生物最常用的凝固剂为琼脂( 其次为明胶 ) ，又叫洋菜、冻粉。它不是一种营养物质，只能被极少数种类的细菌分解利用。琼脂是从海藻中( 主要是石花菜 ) 提取而制成的。 是一种多糖类化合物， 主要成分是复杂的多糖硫酸酯钙盐，琼脂是一种可逆性胶体，在常规浓度下加热到 96℃以上即成溶胶状态，融化的琼脂，当温度下降到42℃以下，又凝固为固体。表 3-1 琼脂与明胶特性比较比较项目琼脂明胶比较项目琼脂明胶熔点 ( ℃ ) 凝固点 ( ℃) 酸碱度灰 分( ％) 氧化钙 ( ％) 氯化镁 ( ％) 氮( ％) 96 40 微酸 16.0 1.15 O.77 O.40 25 20 酸性 14.0— 15.0 0.0 0.0 18.3微生物可利用性耐热性来源化学本质常用浓度（％ )绝大多数微生物不能水解利用强植物多糖1.5 — 2部分微生物能水解利用弱动物蛋白质5 一 12（二）实验材料 1．药品：牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、琼脂；马铃薯，蔗糖；可溶性淀粉、K2HPO4、KN03，MgS04· 7H20、FeSO4· 7H20、等。 2．高压蒸汽灭菌器、恒温干热灭菌箱、细菌过滤器、紫外线杀菌。3．其它：天平、牛角匙、电炉、1N HCl 、1N NaOH、pH 试纸、刻度搪瓷杯、量筒、漏斗、漏斗架、玻棒、带玻璃珠的三角瓶、带棉塞的无菌试管、无棉塞的空试管、培养皿、吸管、各种包装纸、防水纸、...