山 东 省 皮 肤 病 医 院 性 病 实 验 室操 作 手 册文 件 名 称梅毒螺旋体检测标准操作规程编码页数实 施 日 期制订人审核人批准人制 订 日 期审 核 日 期批 准 日 期目的：规范的梅毒螺旋体检验操作，确保检测结果准确。适用范围：性病实验室工作人员责 任 人：实验操作者1、标本的采集与处理标本采集的基本要求1.1.1 操作应规范化。1.1.2 所有标本都应当被视为具有传染性，医务人员应戴手套谨慎操作。梅毒标本采集梅毒的实验室诊断主要有病原体检测和血清学检测方法，各期梅毒的检测方法及部位见下表。临床表现取材部位检查方法一期梅毒溃疡、淋巴结、血液暗视野检查、血清学检查二期梅毒皮损、淋巴结、血液暗视野检查、血清学检查潜伏梅毒血液血清学检查三期梅毒血液、脑脊液血清学检查神经梅毒血液、脑脊液血清学检查1.2.1 血液1.2.1.1血清标本根据需要，用一次性真空采血针与促凝采血管抽取静脉血2-5 ml，室温静置 1-2小时（或 37℃静置 30 分钟），待血液凝固、血块收缩后，3000r/min 离心 10-15分钟，分离新鲜血清，备用。也可采用保存于2-8 ℃或 -20 ℃的血清。溶血、脂血或污染的标本可影响试验结果。1.2.1.2血浆标本根据需要，用一次性真空采血针与抗凝采血管抽取静脉血2-5 ml ，轻轻颠倒混匀 8-10 次， 3000r/min 离心 10-15 分钟，分离血浆，备用。血库血浆以及EDTA抗凝血浆同样可以用于梅毒血清学实验（一般仅用于 RPR实验，），但易出现假阳性反应（需用血清复试） ，如用其他抗凝剂应首先评价后再用。1.2.1.3末梢全血消毒局部皮肤（成人和1 岁以上儿童可选择手指或耳垂，1 岁以下儿童采用足跟部）。一次性采血针刺破皮肤，用无菌棉签擦掉第一滴血。收集滴出的血液，立即用于检测。1.2.2 皮损部位组织液1.2.2.1用于病原学检查用无菌生理盐水浸湿的棉拭子擦去皮损表面的污物，钝刀/ 刮勺轻刮、挤压皮损部位，取渗出液与预先滴加在载玻片上的生理盐水混合后加盖玻片立即用于暗视野显微镜检测，或取渗出液直接涂片，用于镀银染色试验。1.2.2.2用于核酸检测用无菌生理盐水浸湿的棉拭子擦去皮损表面的污物，钝刀/ 刮勺轻刮、挤压皮损部位，刮取渗出液，加入有DNA保存液（ 1ml/ 管）的标本管中，备用。1.2.3 淋巴液无菌操作下穿刺腹股沟淋巴结， 注入无菌生理盐水并反复抽吸2-3 次，取少量的淋巴液直接滴于载玻片上，加盖玻片后立即进行暗视野镜检或备用。1.2.4 脑脊...
