渤海大学实验报告用纸(第 页 共 页) 渤海大学学生实验报告 课程名称: 仪器分析实验 任课教师: 实验室名称: 理工二 房间号 207 实验时间: 2013 年 4 月 3日 学院 化学化工与食品安全学院 专业 班级 姓名 学号 同组人 实验项目 维生素B12注射液的定性分析与定量分析 组别 实验成绩 一、实验目的和要求 1
掌握紫外可见分光光度计的结构及基本操作; 2
掌握吸收曲线的绘制; 3
掌握利用分光光度法进行定性鉴别及定量检测的方法
二、实验原理 物质的紫外吸收光谱是物质分子中生色团和助色团的特征表现,例如具有共轭双键化合物、芳香烃化合物在紫外区都有强烈吸收
维生素B12是含有 Co2+的有机化合物,分子量为 1355
分子式:C63H88CoO14N14P
维生素B12注射液为粉红色至红色的澄明液体
维生素B12在可见光 550处有吸收,VB12中苯环等含有共轭双键,具有吸收紫外光的性质,在 278nm和361nm处也有最大吸收
定性分析 (1) 样品与标准比较,吸收峰位置不超过+/-2nm
(2) 最大吸收峰与相邻吸收峰的比值是否在一定范围内
维生素B12有 3个吸收峰,分别位于 278nm、361nm、550nm
(A1%cm361nm)/( A1%cm278nm)=1
88 (A1%cm316nm)/( A1%cm550nm)=2
定量分析 (1)标准比较法: 根据朗伯-比尔定律:A=Kbc 当 c=1g/100ml,b=1cm时,A=Ebc,E单位:100ml/(g*cm) 国家药典中规定:A标=E1%1cm入361nm 用标准比较法计算: A标/A样=c标/c样 c样=c标*(A样/ A标) 式中,c标=1g/100ml; A标=207; A样:通过测试得到; 样品标示量(样品)= c