渤海大学实验报告用纸（第 页 共 页） 渤海大学学生实验报告 课程名称： 仪器分析实验 任课教师： 实验室名称： 理工二 房间号 207 实验时间： 2013 年 4 月 3日 学院 化学化工与食品安全学院 专业 班级 姓名 学号 同组人 实验项目 维生素B12注射液的定性分析与定量分析 组别 实验成绩 一、实验目的和要求 1 . 掌握紫外可见分光光度计的结构及基本操作； 2 . 掌握吸收曲线的绘制； 3 . 掌握利用分光光度法进行定性鉴别及定量检测的方法。 二、实验原理 物质的紫外吸收光谱是物质分子中生色团和助色团的特征表现，例如具有共轭双键化合物、芳香烃化合物在紫外区都有强烈吸收。 维生素B12是含有 Co2+的有机化合物，分子量为 1355.38.分子式：C63H88CoO14N14P.维生素B12注射液为粉红色至红色的澄明液体。 维生素B12在可见光 550处有吸收，VB12中苯环等含有共轭双键，具有吸收紫外光的性质，在 278nm和361nm处也有最大吸收。 1.定性分析 （1） 样品与标准比较，吸收峰位置不超过+/-2nm。 （2） 最大吸收峰与相邻吸收峰的比值是否在一定范围内。 维生素B12有 3个吸收峰，分别位于 278nm、361nm、550nm。 (A1%cm361nm)/( A1%cm278nm)=1.70-1.88 (A1%cm316nm)/( A1%cm550nm)=2.82-3.45 2.定量分析 （1）标准比较法： 根据朗伯-比尔定律：A=Kbc 当 c=1g/100ml,b=1cm时，A=Ebc,E单位：100ml/(g*cm) 国家药典中规定：A标=E1%1cm入361nm 用标准比较法计算： A标/A样=c标/c样 c样=c标*（A样/ A标） 式中，c标=1g/100ml; A标=207; A样:通过测试得到； 样品标示量（样品）= c样*稀释倍数= 对照样品标示量%=样品标示量（样品）/样品标示量（标准）*100% 式中，样品标示量（标准）=500ug/ml, 对照样品标示量%=90%-110%,合格。 （3） 标准曲线法 在测定样品中的组分含量时，要用与绘制标准曲线完全相同的色谱条件作出色谱图，测量色谱峰面积或峰高，然后根据峰面积和峰高在标准曲线上直接查出注入色谱柱中样品组分的浓度 渤海大学实验报告用纸（第 页 共 页） 三、实验仪器与药品 1．实验仪器 UV-1600型紫外-可见分光光度计 一台; 容量瓶（10ml） 一只 吸量管（5.00ml、1.00ml） 一只； 烧杯 一个； 滴管 一个； 洗耳球 一个； 2.实验药品 维生素 B12注射液（样品）：500ug/ml(医用)； 维生素 B12注射液（标准溶液）：50ug/ml； 四、 实验步骤 1、溶液配...
