基因工程一、基因工程的概念基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，并通过体外 DNA 重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。由于基因工程是在 DNA 分子水平上进行设计和施工的额，因此又叫做 DNA 重组技术。基因工程的别名基因拼接技术或 DNA 重组技术操作环境生物体外操作对象基因操作水平DNA 分子水平基本过程剪切 f 拼接一导入一表达实质（原理）基因重组结果改造的方向克服远缘杂父不亲和的障碍，定向改造生物的遗传特性二、基因工程的基本工具1、限制性核酸内切酶“分子手术刀”2、DNA 连接酶“分子缝合针”3、基因进入受体细胞的载体“分子运输车”1．“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶）（1）存在：主要存在于原核生物中。（2）特性：特异性，一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并且能在特定的切点上切割 DNA 分子。（3）切割部位：磷酸二酯键（4）作用：能够识别双链 DNA 分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。呈现碱基互外对楸无论是奇数个械基还是偶数个碱基］都可 m\一条中心轴线沏图冲轴线两侧的双毬 DNA条链分别切开时，产生的是黏性末端，时，产生的则是平末端。5）识别序列的特点：以中心线CCGC 上的碱基是反向对称重財洌见如皿 CGCCAGGA臥两侧破基互补对称；以为轴俩刚做基互补GGTCCT对称□中轴线6）切割后末端的种类：DNA分子经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式黏性末端和平末端。当限制酶在它识别序列的中轴线两侧TW—将 DNA的两当限制酶在它识别序列的中轴线处切开切翎 JD 珂基于口寸产生的阿科■不 I 司木轴£倚头衣示附的切刚役宜\CCCEcoEE1OAAN 冋切割）■$mI（柱 G 月＜2乏冋切制中轴察平木驹:l'1'CAAOCTTAACCCGGGGGGCCCCCUOOO相同点：都连接磷酸二酯G>AATTCL_|十十十；2.“分子缝合针”——DNA 连接酶(1)作用：将限制酶切割下来的 DNA 片段拼接成 DNA 分子。种类E•coliDNA 连接酶T4DNA 连接酶来源大肠杆菌T4噬菌体功能特性只能将双链 DNA 片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来缝合两种末端，但连接平末端之间的效率较低3.“分子运输车”——载体(1) 载体具备的条件：① 能在受体细胞中复制并稳定保存。② 具有一个至多个限制酶切点，供外源 DNA 片段插入。③ 具有标记基因，供重组 DNA 的鉴定和选择。(2) 最常用的载...
