限制酶MIA 连接酶载体目縫因旌麺阜因表那体的构肄将目用基因导入受体细翘目錘因的检测与鉴定1操作工操伽基操作程序、基因工程—►蛋白质工程应可生产自耀中没有濮白专题五遗传的分子基础时间第二部分基因工程一、考纲要求:、基因工程的诞生(I)、基因工程的原理及技术(含技术)(II)、基因工程的应用(II)、蛋白质工程(I)二、知识网络:魁 Bfi 物基因工程药物基因 Sfi 疗三、课本填空:【基因工程的概念】基因工程是指按照人们的愿望,进行严格的设计,通过体外重组和转基因技术,赋予生物以新的遗传特性,创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因工程是在分子水平上进行设计和施工的,又叫做重组技术。基因工程的原理是(一)基因工程的基本工具:限制酶、连接酶、载体“分子手术刀”限制性核酸内切酶(简称为限制酶)()来源:主要是从中分离纯化出来的。(真核生物中也有,如:酵母菌)()功能:能够识别双链分子的某种特定的核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的断开,因此具有专一性。大多数限制酶的识别序列由个核苷酸组成,少数也有、、个组成。()结果:经限制酶切割产生的片段末端通常有两种形式:和。“分子缝合针”一一连接酶两种连接酶(连接酶和连接酶)的比较:① 相同点:都缝合磷酸二酯键。② 不同点:・连接酶来源于大肠杆菌,只能将双链片段互补的末端之间的磷酸二酯键连接起来;而连接酶来源于噬菌体,能缝2合两种末端,但连接平末端的之间的效率较低。与聚合酶作用的异同聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端,形成磷酸二酯键。连接酶是连接两个片段的末端,形成磷酸二酯键。“分子运输车”载体()载体具备的条件:①能在受体细胞中,或整合到染色体上,随染色体进行同步复制。② 具有一至多个,供外源片段插入。③ 具有,供重组的鉴定和选择。(注意:标记基因不一定都是抗性基因)()最常用的载体是它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌拟核之夕卜,并具有自我复制能力的双链状分子。(天然质粒常需进行人工改造)()其它载体:、二基因工程的基本操作程序:基因工程的操作程序主要包括四个步骤:、第一步:目的基因的获取目的基因主要是指:编码的结构基因。也可以是一些具有。目的基因可以从已有的物种中分离出来,也可以用人工的方法合成。原核基因常采取直接分离获得,真核基因常采用人工合成。目前常用的获取目的基因的方法有以下几种:(1)从基因文...