核酸分析Nucleicaicds汇总VIP免费

第五章核酸分析（ Nucleic aicds）第一节 基础知识一．核酸的基本概念核酸――生物大分子――线性多聚核苷酸 P444 核酸多聚核苷酸 polynucleotide 戊糖 + 碱基磷酸核糖 Ribose 腺嘌呤 Adenine-A 脱氧核糖鸟嘌呤 Guanine-Gdexoyribose胞嘧啶 Cytosine-C胸腺嘧啶 Thymine-T 尿嘧啶 Uracil-U DNA 脱氧核糖核酸dexoyribonucleic acid RNA 核糖核酸 ribonucleic acid 核酸存在于细胞中，DNA——细胞核 RNA——细胞质病毒目前最大分子，电镜下可见，二． DNA结构天然 DNA右手双螺旋链状结构，碱基（ A,T,C,G ）互补结合（氢键） （base complementary ），遗传信息载体，极重要生物学意义，DNA 复制，转录。反转录结构： P446 糖和磷酸脂化反应——形成链的框架糖－碱基缩合反应——糖苷键三． RNA结构1. 结构：线形多聚合苷酸，与DNA结构不同点① 戊糖－核糖② AGCU-用 V 尿嘧呤代替胸腺嘧呤③ 单链线形分子，局部双螺旋，自身回折2. 种类：三种核糖体 RNA（ribosomal RNA rRNA ）转运 RNA（transfer RNA tRNA）在蛋白质合成过程中具有转运 AAs的作用信使 RNA (messager RNA mRNA) 以 DNA为模板又是蛋白质合成模板遗传信息 DNA —转录— mRNA—翻译，转译—蛋白质模板 transcription translation 复制直接模板replication ——每种 mRNA 携带从 DNA 转录的一种或几种蛋白质编码遗传信息—— tRNA携带 AAs，可确认 mRNA 编码DNA结构1953．4．25 Nature 900词 文章Watson 沃森 (25) 生物学家Crick 克里克 (35) 物理学家1951 秋 Watson 美国博士后，丹麦哥本哈根，那不勒斯开会，威尔金斯DNA报告英国剑桥大学卡文迪许实验室威尔金斯，富兰克林，x 线衍射，螺旋结构鲍林，化学家蛋白质α- 螺旋沃- 克：数据；方法——积木提示——氢键遗传信息——的提示——碱基互补第二节核酸提取、分离、纯化提取对象：细胞，组织中——染色体，DNA RNA 细菌，质粒 DNA 提取过程：① 细胞组织破膜、释放、内容物② 分离提取液，除DNA，RNA以外的组分③ DNA，RNA浓缩一．细胞中DNA提取① 细胞组织在裂解液中（Triton X-100和 SDS缓冲液）匀浆溶膜破解——提取液② 利用蛋白水解酶和核糖核酸酶温育，除去蛋白质和RNA ③ DNA提取，进入乙醇见书 P449 （1） 在 6 Vols 裂解液中匀浆（2） 除细胞碎片和离心方法（3） 温育，与蛋白酶K 温育（4） CHCL3 3 ...