植物组织培养 概念(广义)又叫离体培养,指从植物体分离出符合需要的组织
器官或 细胞 ,原生质体等,通过无菌操作,在人工控制条件下进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术
植物组织培养概念(狭义)指用植物各部分组织,如形成层
胚乳等进行培养获得再生植株,也指在培养过程中从各器官上产生愈伤组织 的培养,愈伤组织再经过再分化形成再生植物
组织培养的步骤一、培养基配制配制培养基有两种方法可以选择,一是购买培养基中所有化学药品 ,按照需要自己配制;二是购买商品的混合好的培养基基本成分粉剂,如MS、 B5 等
自己配制可以节约费用,但浪费时间、人力、且有时由于药品的质量问题,给实验带来麻烦
就目前国内的情况看,大部分还是自己配制
为了方便起见,现以MS培养基 为例介绍配置培养基的主要过程
1、配制几种母液( 1)配制 MS大量元素母液一般将大量元素分别配制成100 倍的母液,使用时再分别稀释100 倍
分别称取NH4NO3 165g KH2PO4 17g KNO3 190g CaCl2· 2H2O 44g MgSO4· 7H2O 37g 各自配成1L 的母液
倒入1L 试剂瓶中,存放于冰箱中
( 2)配制 MS微量元素母液一般将微量元素配制成100 倍母液
依次称取KI Na2MoO4· 2H2O H3BO3 CuSO4· 5H2O MnSO4· H2O CoCl2· 6H2O ZnSO4· 7H2O 配成 1L 母液,倒入1L 试剂瓶中,存放于冰箱中
CuSO4· 5H2O 和 CoCl2· 6H2O 由于称取量很小,如果 天平 精确度没有达到万分之一,可先配成调整液
分别称取CuSO4· 5H2O CoCl2· 6H2O 各自配成100ml 的调整液,然后取5ml 就还有的量
( 3)配制 MS有机母液一般配制成100 倍 M