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流式细胞仪的应用

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流式细胞仪的应用流式细胞仪的应用姓名:学号: 2002015002 单位:研究生二队专业:病理学与病理生理学对于一个毕业以后就从来没有进过实验室使用过各种尖端仪器的研究生来说,仪器分析这个课程对我来说显而易见是重要而又陌生的,就像一个小孩到了游乐园一样,每一种仪器都很吸引我, 好奇心也驱使我特别想尽快操作一下这些仪器,唯一的遗憾是本课程课时太少,不能把中心实验室的所有仪器都了解一遍。12 月 4 号学习了流式细胞仪的原理与基本应用方法,虽然没有操作过, 但是我想对我在本次课上的所学的内容做一下总结并谈谈对流式细胞仪的粗浅认识,由于没有实际基础,不对的地方请老师多多谅解并纠正。流式细胞仪( Flow cytometry)是对细胞进行分选和快速测的仪器。 它可以将分散在液体中的各个细胞的物理性质,生物化学特征等参数进行快速测量并根据所得参数范围对目的细胞进行分选并存贮。这些参数可以包括每一个细胞的体积、细胞凋亡及所包含的可标记的蛋白质或者核酸的快速定量等。与传统的细胞测量方法(免疫荧光和免疫印迹)相比,其优缺点可总结如下表:流式细胞仪免疫荧光免疫印迹优点1、明确阳性细胞比例2、同时检测多种蛋白表达3、蛋白定量容易4、速度快,灵敏度高5、阳性细胞的相对数量6、明确组织和细胞内定为1、检测整体表达情况2、蛋白定量较容易缺点不能在组织和细胞内定位1、蛋白定量困难2、仅检测局部表达情况1、不能组织或细胞内定位2、不能确定阳性细胞比例由上表可以看出, 与传统的细胞检测方法相比,流式细胞仪具有无可比拟的技术优势和应用前景, 甚至可以说流失细胞术完全能够推动医学科研的发展,是一个伟大的发明。流式细胞仪的原理:将待测的细胞样品制作成单个细胞的混悬液,根据实验目的对需要检测和分选的细胞进行特异性荧光染色并放入样品管, 在清洁气体的压力下进入流动室。流动室内含有鞘液, 鞘液可以约束样品使之处在喷嘴中心以提高测量精度,并防止样品靠近喷孔壁以导致堵塞。 在这种作用下细胞排成单列一个一个地在鞘液包裹下被喷嘴喷出形成液体流柱。 流柱流经高度聚焦的激光束时被特异染色的细胞被激发而产生特异性荧光,荧光被检测系统检测并转变成电信号进入计算机分析系统而得到细胞的物理、生物特性。流式细胞仪的分选功能是由细胞分选器来完成的:由喷嘴射出的液柱被分割成一连串的小水滴,根据选定的某个参数由逻辑电路判明是否将被分选,而后由充电电路对选定细胞液滴充电,...

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