下载后可任意编辑液相蛋白芯片技术液相蛋白芯片技术由美国纳斯达克上市公司 Luminex 研制开发并于2O 世纪 9O 年代中期进展起来, 是在流式细胞技术、 酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)技术和传统芯片技术基础上开发的新一代生物芯片技术和新型蛋白质讨论平台。液相蛋白芯片技术推动了功能基因组时代的蛋白质讨论, 相关的仪器、 分析软件以及试剂盒研发备受瞩目并已形成一定的市场规模。现拟对该技术的基本原理、 技术特点及其在免疫诊断和分析领域的讨论和应用情况进行综合介绍。一、 液相蛋白芯片技术的基本原理传统的蛋白芯片技术是将蛋白质分子有序地固定在滤膜、 滴定板和载玻片等固相载体上, 用标记了特定荧光抗体的蛋白质等生物分子与芯片作用, 再利用荧光或激光扫描技术测定其荧光强度, 经过荧光强度分析蛋白质与蛋白质的相互作用, 从而达到讨论蛋白质功能或免疫诊断的目的。但固相载体难于维持蛋白质的天然构象, 不利于蛋白质功能讨论。液相芯片技术在国际上被称之为 xMAP (flexible MultilyteProfiling) 技术, 其核心技术是乳胶微球包被、 荧光编码以及液相分子杂交。液相芯片体系以聚苯乙烯微球 ( beads ) 为基质, 微球悬浮于液相体系, 每种微球可根据不同讨论目的标定上特定抗体或受体探针, 可对同一样品中多个不同的分子同时进行检测。微球表面可进行一系列修饰以适合固定各种蛋白、 多肽或核酸等生物分子。xMAP下载后可任意编辑技术可应用于蛋白或核酸的功能及其相互作用讨论, 分别称之为液相蛋白芯片技术和液相基因芯片技术。液相蛋白芯片体系主要包括微球、 蛋白探针分子、 被检测物和报告分子四种成分。在液相系统中, 为了区分不同的探针, 每一种用于标记探针的微球都带有独特的色彩编码, 其原理是在微球中掺入不同比例的红色分类荧光及发色剂, 可产生 100 种颜色差别的微球, 可标记上100 种探针分子, 能同时对一个样品中多达 100 种不同目标分子进行检测。反应过程中, 探针和报告分子都分别与目标分子特异性结合。结合反应结束后, 使单个的微球经过检测通道, 使用红、 绿双色激光同时对微球上的红色分类荧光和报告分子上的绿色报告荧光进行检测, 可确定所结合的检测物的种类和数量。二、 液相蛋白芯片技术的特点液相蛋白芯片技术有机地整合了微球、 激光检测技术、 流体动力学、 高速的数字信号处理系统和计算机运算功能, 不但检测速度极...
