精品文档。1欢迎下载细胞代谢产物提取物中分解产物的鉴定摘要： 分析细胞代谢产物的方法大多数都需要从细胞中提取代谢产物。这些方法关注的是由于提取不完整造成对代谢水平的估计不足。然而，通过这些提取方法的比较，似乎提取一个特定的代谢产物最好的方法是使产量达到最大。在以不同浓度甲醇水溶液提取大肠杆菌的实验中：通过液相色谱 - 串联质谱法对提取结果进行分析，我们观察到使用含水量≥50%的溶液进行提取得到的核苷和碱基的产量比使用含水量≤20%的溶液进行提取要高。然而，在提取物中添加标记了同位素的核苷进行示踪显示，核苷和碱基的高产量是由于核苷和核苷酸在水分充足条件下分解导致的，而不是因为采用了良好的提取方法。同位素示踪标记法是检测细胞代谢物提取物中分解产物普遍采用的一个方法。甲醇水溶液提取大肠杆菌实验中，低温和高浓度的甲醇最大限度的降低了代谢物的分解。关键词： 代谢组学；新陈代谢；提取；细菌；取样；稳定性；液相色谱- 质谱 / 质谱法；三重四极杆；小分子细胞代谢网络在生物学， 将吸收的营养物质转化成能源，生物大分子亚基和信号分子中起着基础性作用。 由于这些过程的重要性， 人们对尽可能完整的理解细胞代谢活动有很大的兴趣。 为此，在过去 5 年研究中， 在并行文献中看到试图对细胞代谢网络的许多组成成分的研究显著加快， 普遍关注的是通过改变营养状况造成细胞环境的扰动而导致代谢产物浓度的定量变化。代谢产物分析遇到的一个长期挑战是从生物样品中提取感兴趣的化合物。尽管避免了需要通过直接在居住环境范围内对感兴趣的分析物进行提取来衡量，这种可能性是很吸引人的 （例如，采用核磁共振 [NMR])，绝大多数的代谢产物分析仍继续通过提取完成。提取物的使用在样品的浓缩和分离中具有重要优势。此外，使用质谱（MS）有利于分析，质谱对于从复杂的混合物中鉴定和定量低含量的组成成分来说是一项独特的强大技术。在努力使基于细胞的代谢更加定量和系统的一部分研究中，已经有越来越多的研究来确定适合广泛的代谢产物谱的提取条件，同时也了解这些提取过程的局限性。例如， Maharjan 和 Ferenci 采用薄层色谱法分析放射性标记的样本，研究了分别以沸乙醇水溶液， 冷甲醇水溶液和热甲醇水溶液，冷高氯酸溶液和冷氢氧化钾水溶液提取大肠杆菌的效率。 根据其得到最高数量代谢产物的提取方法的产量最高，同时也能够避免高温或极端 PH的直接影响，他们发现冷甲醇水溶液法（...
