微生物限度检验标准操作规程

1目的规范微生物限度检验操作，确保检验结果准确、可靠。2依据《中国药典》2010 版。3范围本标准适用于微生物限度检验。4责任中心化验室负责人：对本规程的实施负责。中心化验室检验人员：严格按照本规程执行检验操作。5程序5.1执行标准：《中国药典》2010 版。5.2抽样：照《取样标准操作规程》进行。6细菌、霉菌及酵母菌计数计数方法包括平皿法和薄膜过滤法。检查时，按已验证的计数方法进行供试品的细菌、霉菌及酵母菌菌数的测定。6.1设备、仪器及用具6.1.1设备微生物限度检测室室、净化工作台、生化培养箱（3O-35oC）、生化培养箱（23-28oC）、电热恒温水浴锅、烘箱、电冰箱、灭菌柜、紫外灯等。6.1.2 仪器及器皿显微镜、托盘天平、锥形瓶、研钵、培养皿、量筒、试管及塞、吸管、薄膜过滤器等。6.1.3用具大、小橡皮乳头，洁净工作服、口罩、医用手套、接种环、酒精灯、酒精棉球、灭菌剪刀、灭菌镊子、不锈钢药匙、试管架、火柴、记号笔、薄膜过滤膜等。6.2试液6.2.1消毒液A．0.1%新洁尔灭溶液：供手消毒、擦拭操作台面用。B. 75%乙醇溶液6.2.2稀释液、试剂及配制A. PH7.0 无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液：取磷酸二氢钾 3.56g、磷酸氢二钠 7.23g、氯化钠 4.3g、蛋白胨 l.Og,加纯化水 1000ml,微温溶解，滤清，分装，1210C 灭菌 15 分钟。B. 聚山梨酯 80C. 吐温 80D. 单硬脂酸甘油酯6.3培养基营养琼脂培养基、玫瑰红钠琼脂培养基6.4操作方法6.4.1试验前准备6.4.1.1 将供试品及所有已灭菌的平皿、锥形瓶、试管、吸管（1ml、10ml）、量筒、稀释剂等移至传递窗内。每次试验所用物品必须事先计划，准备足够用量，避免操作中出入操作间。6.4.1.2 开启微生物检测室紫外灯和空调净化系统，并使其工作不低于 30min。6.4.1.3 操作人员进入一更，用洗手液或肥皂洗手，烘干。进入二更，用 0.1%新洁尔灭溶液洗手，穿戴洁净无菌服、口罩、手套。6.4.1.4 操作前先用乙醇棉球擦手，再用乙醇棉球擦拭供试品瓶、盒、袋等的开口处周围，待干后用灭菌的手术镊或剪将供试品启封。6.4.2供试液的制备供试液的制备若需用水浴加温时，温度不宜超过 450C,时间不得超过 30 分钟。除另有规定外，常用的供试液制备方法如下：6.4.2.1 液体供试品取供试品 10ml，力口 pH7.0 无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至 100ml，混匀，作为 1:10 的供试液。油剂可加入适量的无菌聚山梨酯 80 使供试品分散均匀。水溶性液体制剂也可用混合的供试品原液作为供试液。6.4....