纤维素降解菌的筛选及其发酵产酶条件研究样本

下载后可任意编辑纤维素降解菌的筛选及其发酵产酶条件讨论李莹姝 阎淑珍( 南京师范大学生命科学学院, 南京 210046) 摘要: 纤维素酶是一种分解纤维素的高活性生物催化剂, 具有广泛的应用价值。为了获得高活性的纤维素降解细菌, 对从南京师范大学北区枯叶堆及其附近土壤采集的样品进行富集和刚果红纤维素平板初筛, 得到 6 株产纤维素分解酶的菌株, 其中 5 株为细菌( B1、 B3、 B4、 B8、 B10) , 1 株可能为真菌(B10)。经过水解圈复筛, 得到两株产酶活性较高的细菌菌株 B3、 B10, 经过细菌形态观察及生理生化鉴定, 初步鉴定 B3 为革兰氏阳性杆菌( 可能为巨大芽孢杆菌) 、 B10 为革兰氏阳性杆菌。经过摇瓶发酵, 测定其 CMCase、 FPA 酶活力, 结果表明 B3 和 B10 两菌株分别在培育第三天后所产 CMC 酶的活力达到最高, 分别为55.09 U/mL 和 44.99 U/mL, 而且两株菌均在培育基 PH 为 8 时酶活力最高。B3菌株基本没有 FPA 酶活力, B10 菌株在培育三天后 FPA 酶活力达到最高 104.14 U/mL,。可进一步经过紫外诱变育种等方法提高产酶量及酶活性, 进行进一步讨论。关键词: 纤维素酶, 微生物, 筛选鉴定, 酶活 纤维素是自然界分布最广、 最丰富、 最廉价的可再生性有机资源和多糖物质, 随着地球上不可再生资源日益耗竭, 如何有效转化和利用这一丰富资源, 成为各国关注的重要领域[1]。进展和利用生物技术分解转化天然纤维素原料, 得到可利用的糖, 再进一步转化为燃料乙醇、 燃气等能源物质或者菌体蛋白等食品, 成为当前国际讨论的热点。[2]采纳微生物技术解决这一问题是当前讨论最多方法。当前讨论较多的是霉菌, 尤以绿色木霉、 里氏木霉和康氏木霉为典型[3] ,对细菌讨论较少。分离筛选能够高产纤维素酶, 有效降解纤维素的微生物菌种是应用纤维素材料的首要前提, 高产降解纤维素细菌的获得、 得到比较稳定的菌剂及应用于工农业上, 对解决当今世界所面临的粮食短缺、 饲下载后可任意编辑料资源紧张、 能源危机和环境污染等问题具有深远的意义[4] 。 土壤中的微生物, 大约 70%~90%是细菌。细菌适宜在酸碱度接近中性的潮湿土壤中生长, 绝大多数分布在距地表约 3-8cm 的土壤层。因此, 土壤取样时, 一般要铲去表层土。另外, 土样的采集要选择富含纤维素的环境, 这是因为在纤维素含量丰富的环境, 一般会聚集较多的分解纤维素的微生物。 本实验从腐烂枯叶附近的土壤...