不可忽视的转膜和封闭WesternBlot专题(经验篇)VIP专享

不可忽视的转膜和封闭:WesternBlot 专题(经验篇) 生物通技术专题：既可以定性，又可以半定量的 Western 是初步鉴定蛋白质最方便也是最通用的方法。Western 印迹要想做的好，当然每个步骤都不能马虎，看看这张图，从电泳，转膜，封闭，一抗，二抗到最后的检测，就像“发现号” 升空的 120 万个步骤那样一个也不能少。如果忽视了其中的一步，结果做不出来，也是令人非常头痛的。 “工欲善其事，必先利其器” ，要想有好的实验结果，好仪器是相当重要的，因此让我们先来看看什么样的仪器能让我们无后顾之忧，顺利痛快的一步到位。 Western 印迹的仪器主要就是电泳系统和电转移系统了，最好的品牌当然是 Bio-Rad 和Amersham（GE Healthcare）的 Hoefer 系列了，现在国内出品的物美价廉的电泳系列产品，也是不错的选择，几乎每个实验室都需要至少一套Mini Cell 吧？如果还没有你该怎么挑选呢。 一、Bio-Rad 经典 Mini 系列 Bio-Rad Laboratories 由 David Schwartz 先生和妻子化学家 Alice Schwartz于 1957 年创建，总部位于加州 Hercules，下设三大部门— — 生命科学部，临床诊断部和工业材料部，其中生命科学部成功跻身世界排名前五名。在2004 年，Bio-Rad 还低价收购了因侵犯知识产权限于困境的 MJ Research，使得伯乐在PCR 领域的市场份额骤然扩大。Bio-Rad 生命科学部产品包括蛋白组研究产品、层析仪与填料、蛋白质和核酸电泳产品等，不过最为普通实验室熟悉的莫过于蛋白电泳 Mini 系列和层析仪。只要是提到 SDS-PAGE，Bio-Rad 绝对是每个实验室首先考虑的品牌，经典就是经典呀。 Mini-PROTEAN3 电泳系统与Mini Trans-Blot 转移系统这一套Mini 系列可谓是Bio-Rad 最多人熟悉和称道的产品了。自上个世纪50 年代Raymond 利用聚丙烯酰胺凝胶的分子筛性质来延缓蛋白质的迁移率从而达到分离蛋白的目的以来，经过这么多年来的发展， SDS-PAGE 电泳技术已经基本成熟了。而且在操作手段方面也越来越简便，越来越准确。Mini Protein Cell 的出现使得Western 的制胶和电泳的消耗成本更经济、操作更简便快速——这种简便也间接促进了Western 技术的更广泛采用。而Mini-PROTEAN 3 自被生产出来那天就可以说是“踩在巨人的肩膀上”，因为它吸取了Bio-Rad 之前第一代和PROTEAN 2 微型垂直电泳仪的优点，并在其基础上进行了优化，所以获得了全球实验人员广泛的认同与喜爱。 Mini-PROTEAN 3...