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免疫比浊法测C反应蛋白

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免疫比浊法是抗原抗体结合动态测定方法。其基本原理是:当抗原与抗体在特殊稀释系统中反应而且比例合适(一般规定抗体过量)时,形成的可溶性免疫复合物在稀释系统中的促聚剂(聚乙二醇等)的作用下,自液相析出,形成微粒,使反应液出现浊度。当抗体浓度固定时,形成的免疫复合物的量随着检样中抗原量的增加而增加,反应液的浊度也随之增加。通过测定反应液的浊度与一系列标准品对照,即可计算出检样中抗原的含量。 抗体(Ab)与可溶性抗原(Ag)反应,形成一定结构的免疫复合物,成为悬浮于反应溶液中的微粒。在沉淀反应中形成的复合物微粒具有特殊的光学性质,可用仪器检测,提高了检测的速度、灵敏度和易操作性。 免疫比浊测定注意事项: 1、抗原或抗体量大大过剩,可出现可溶性复合物,造成误差。 2、应维持反应管中抗体蛋白始终过剩。 3、易受到脂血的影响。 分类 1.免疫透射比浊法 抗原抗体结合后,形成免疫复合物,在一定时间内复合物聚合出现浊度。当光线通过溶液时,可被免疫复合物吸收。免疫复合物量越多,光线吸收越多。光线被吸收的量在一定范围内与免疫复合物的量成正比。利用比浊计测定光密 度值 ,复合物的含量与光密 度值 成正比,同 样当抗体量一定时,光密 度值 也与抗原含量成正比。本法较 单 向 琼 脂扩散 试 验 和火 箭 电 泳 等一般免疫化 学定量方法敏感 、快 速简 便 ,但 要 求 免疫复合物的数 量和分子 量达 到一定高度,否 则 就 难 以 测出。 2.免疫散 射比浊法 一定波 长 的光沿 水 平 轴 照射,通过溶液使遇 到抗原抗体复合物粒子 ,光线被粒子 颗 粒折 射,发 生 偏 转 ,光线偏 转 的角 度与发射光的波 长 和抗原抗体复合物颗 粒大小 和多少 密 切 相关 。散 射光的强 度与复合物的含量成正比,即待 测抗原越多,形成的复合物也越多,散 射光也越强 。散 射光的强 度还 与各 种 物理因 素 ,如 加入 抗原或抗体的时间、光源的强 弱 和波 长 、测量角 度等密 切 相关 。散 射比浊法又 分为速率 散 射比浊法和终点 散 射比浊法。 3.免疫胶 乳 比浊法 胶 乳 比浊法即是将 待 测物质相对应的抗体包 被在直 径 为15- 60nm 的胶 乳 颗 粒上 ,使抗原抗体结合物的体积 增大,光通过之后,透射光和散 射光的强 度变 化 更 为显 著 ,从 而提高试 验 的敏感 性。 实验八 免疫比浊法测...

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