电脑桌面
添加小米粒文库到电脑桌面
安装后可以在桌面快捷访问

外源DNA残留量测定(荧光定量PCR法)标准操作规程SOP

外源DNA残留量测定(荧光定量PCR法)标准操作规程SOP_第1页
1/9
外源DNA残留量测定(荧光定量PCR法)标准操作规程SOP_第2页
2/9
外源DNA残留量测定(荧光定量PCR法)标准操作规程SOP_第3页
3/9
外源性 DNA 残留量测定法(荧光定量 PCR 法)标准操作规程文件编码:XXXXXX1.目的 12.范围 13.职责 14.依据 15.定义 16.内容 16.1.原理 16.2.实验材料 16.3.操作步骤 36.4.结果计算 66.5.判定标准 76.6.注意事项 77.相关文件 78.附件 79.变更历史 7外源性 DNA 残留量测定法(荧光定量 PCR 法)标准操作规程文件编码:SOPO3O2O25-O1 第 3 页/共 7 页外源性 DNA 残留量测定法(荧光定量 PCR 法)标准操作规程文件编码:SOP030202外源性 DNA 残留量测定法(荧光定量 PCR 法)标准操作规程文件编码:SOP030202文件编码:SOP030202623.仪器与用具荧光定量 PCR 仪、无菌 1.5/2.0ml 低吸附离心管(PCR 级洁净)、离心机、洁净工作台、涡旋混合仪、水浴锅、移液器、防气溶胶带滤芯移液器吸头、磁力架(AppliedBiosystems)、荧光定量 PCR 反应管/板。6.3.操作步骤6.3.1.标准曲线稀释取已分装的 CHO 细胞 DNA 国家标准品,用 TE 缓冲液稀释到 3x10spg/ml 后,按下表分别进行 10 倍梯度稀释。Tube 编号稀释方法DNA 浓度(pg/ml)SD1/3x105SD250ylSD1+450MTE3x104SD350ylSD2+450MTE3x103SD450ylSD3+450MTE300SD550ylSD4+450MTE30SD650ylSD5+450MTE36.3.2.样品处理根据各品种项下具体要求,进行样品处理;如需采用试剂盒对样品进行残留 DNA提取,应按以下步骤进行:n.V'M 待测样品:根据各品种项下规定,取待测样品 100 卩 1 或 200 卩 1 于 2.0ml 的离心管,一般每批样品做三个平行。h.—加标样品:取待测样品 100 卩 1 或 200 卩 1 于 2.0ml 的离心管,并加入适量阳性DNA,DNA 加入量应约为样品 DNA 含量的 2~10 倍。63.2.3.提取阴性对照(NEG):取 100 卩 1 或 200 卩 1 的 TE 缓冲液于 2.0ml 的离心管,作为提取阴性对照。外源性 DNA 残留量测定法(荧光定量 PCR 法)标准操作规程文件编码:SOP030202文件编码:SOP030202心「.4 以上各管加入 10 卩 1(每 100 卩 1 样品)的 NaCl 溶液,调整盐离子的含量。63.2.5.蛋白酶处理:各管加入蛋白酶 K 混合液 70 卩 1(每 100 卩 1 样品),其中含蛋白酶 K10 卩 1、蛋白酶 K 缓冲液 60 叭 56°C 水浴 30 分钟。『C.hLysisbufferSolutionMix 的配制:Glycogen(5mg/m1)180 卩 1、tRNA(10mg/m1)4pl、LysisBuffer7600pl 混匀,每管各加入 360 卩 1(每 100^1 样品)。h...

1、当您付费下载文档后,您只拥有了使用权限,并不意味着购买了版权,文档只能用于自身使用,不得用于其他商业用途(如 [转卖]进行直接盈利或[编辑后售卖]进行间接盈利)。
2、本站所有内容均由合作方或网友上传,本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供研究参考,付费前请自行鉴别。
3、如文档内容存在违规,或者侵犯商业秘密、侵犯著作权等,请点击“违规举报”。

碎片内容

外源DNA残留量测定(荧光定量PCR法)标准操作规程SOP

确认删除?
VIP
微信客服
  • 扫码咨询
会员Q群
  • 会员专属群点击这里加入QQ群
客服邮箱
回到顶部