1第十四章分子发光分析法molecular luminescence spectrometry 14
1 概述一、分子发光分析法及其分类 某些物质的分子吸收一定能量后，电子从基态跃迁到激发态，以光辐射的形式从激发态回到基态，这种现象称为分子发光，在此基础上建立起来的分析方法为分子发光分析法
较高激发态基 态吸收能量受激光辐射退激分子在退激过程中以光辐射形式释放能量 根据分子受激时所吸收能源及辐射光的机理不同分为以下几类：光致发光：以光源来激发而发光电致发光：以电能来激发而发光生物发光：以生物体释放的能量激发而发光化学发光：以化学反应能激发而发光— 化学发光分析法荧光— 荧光分析法磷光— 磷光分析法二、分子荧光分析法的特点1
灵敏度高 荧光强度随激发光强度增强而增强（提高激发光强度，可提高荧光强度
荧光检测的信号是发射光的绝对强度，采用高灵敏度的检测系统可大大提高灵敏度，检测限荧光分析法比分光光度法低2~4个数量级激发发射荧光强强激发光物 质2
选择性好 不同的物质用不同的光进行激发，选择不同的激发光波长 不同的物质发射的荧光不同，选择不同的检测荧光波长 比较容易排除其它物质的干扰，选择性好3
实验方法简单4
待测样品用量少；仪器价格适中；测定范围较广 发光强度可定量测定许多痕量的无机物和有机物，广泛应用在生物化学、分子生物学、免疫学及农牧产品分析、卫生检疫等领域
荧光法比磷光法应用广泛14
2 荧光和磷光光谱法一、荧光和磷光光谱的产生 具有不饱和基团的基态分子光照后，价电子跃迁产生荧光和磷光基态分子价电子跃迁到激发态光照激发去激发光π* → ππ* → n基 态 在光致激发和去激发光的过程中，分子中的价电子（ π、n电子）处于不同的自旋状态，通常用电子自旋状态的多重性来描述
2荧光涉及吸收和发射两个过程1
激发态基态激发态分立轨道上π﹡↑↑↓
