精品文档---下载后可任意编辑GP73 高尔基体定位信号及与 HCV 相互调控机制的讨论的开题报告背景与意义:高尔基体(Golgi apparatus)作为细胞内主要的蛋白质转运中心,参加了一系列复杂的物质运输和分泌过程
高尔基体是一个含有多个结构分明的体积较大的成熟体器官,分别为高尔基抽象体、近侧裂袋、转移站和远侧裂袋
高尔基体定位信号是能够将蛋白质准确运输至高尔基体的重要信号序列
目前已知的高尔基体定位信号包括 KDEL、KKXX、di-lysine 以及di-arginine 等,其中 di-arginine 序列在哺乳动物细胞中最为广泛
许多病毒也利用宿主细胞的高尔基体定位信号来定位,从而促进其感染与复制
HCV(Hepatitis C virus)是一种导致严重肝炎与肝硬化的 RNA病毒,感染人群广泛
讨论发现,HCV 感染会导致高尔基体功能紊乱,蛋白质运输和分泌过程出现问题
因此探究高尔基体定位信号对 HCV 感染与复制的影响,对于破解 HCV 感染机制,以及进一步研发治疗手段具有重大意义
讨论目的:基于前期工作发现,di-arginine 序列在细胞内定位至高尔基体的能力较弱,因此本讨论旨在探究如何增强 di-arginine 序列的高尔基体定位能力,并分析 HCV 感染与高尔基体定位信号之间的相互影响机制
讨论方案:本讨论将通过以下几个方面的实验来达成讨论目标:1
人类细胞中 di-arginine 序列的高尔基体定位能力的分析
构建 di-arginine 序列的突变体,利用荧光显微镜和细胞图片分析技术分析突变体与高尔基体的定位关系
利用免疫共沉淀技术,寻找对 di-arginine 序列靶向物分子进行鉴定
分析 HCV 感染细胞后,di-arginine 序列的高尔基体定位和突变体的变化规律,并进一步探究 HCV 感染对 di-arg