精品文档---下载后可任意编辑MicroRNA--200b 调控细胞周期蛋白 p27 进而促进结肠癌增殖的机制的开题报告开题报告一、讨论背景和意义结肠癌是一种非常常见的恶性肿瘤,其发生和进展是一个复杂的过程,涉及到多个信号通路和分子机制的调节
在过去的几年里,MicroRNA (miRNA)作为一种离子小、高保真、高量测、具有可逆性的调控分子,在肿瘤发生、进展、转移等方面引起了广泛的关注
miRNA-200b,在多种肿瘤如表皮下肉瘤、乳腺癌、肺癌、卵巢癌和结肠癌等中均表达下降
但是,这种 miRNA 的具体作用机制在结肠癌中的发病机制方面尚不清楚
最近的讨论表明,miRNA-200b 可以通过调节肿瘤抑制蛋白 p27 的表达来调节细胞周期,而 p27 作为细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK)抑制剂,其中许多表达上游 miRNA 的基因都是结肠癌增殖的保护因子,但 miRNA-200b 和 p27 之间的相互作用对结肠癌的影响尚未进行详细讨论
因此,本讨论旨在探究 miRNA-200b 调节细胞周期蛋白 p27 进而促进结肠癌增殖的分子机制
二、讨论内容和方法1
构建 miRNA-200b 和 p27 的表达质粒2
结肠癌细胞的体外培育评估3
利用 MTT 测定法和流式细胞术评估在 p27 水平下结肠癌细胞存活率4
定量 PCR 和蛋白印迹法检测对 miRNA-200b 进行调节后 p27 水平的变化5
检测肿瘤体内增加 miRNA-200b 水平对结肠癌生长的影响三、预期结果我们希望证明 miRNA-200b 可以通过调节 p27 表达促进结肠癌细胞增殖
我们估计将获得以下结果:1
miRNA-200b 的增加将降低 p27 的表达水平
结肠癌细胞的存活率将随增加的 miRNA-200b 水平而增加
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着重提高 miRNA-200b 水