精品文档---下载后可任意编辑MicroRNA 靶向 Id1 对 BMSCs 成骨分化的影响中期报告材料与方法：1. 内容：利用 in vitro 体外细胞培育模型，采纳骨髓间充质干细胞(BMSCs)进行实验，模拟条件下，利用 qPCR、Western blot、ALP 活性定量法、Alizarin 红染色等方法，讨论 microRNA 靶向 Id1 对 BMSCs成骨分化的影响。2. 实验过程：(1) 倒置荧光显微镜下 BMSCs 观察培育情况；(2) qPCR 检测 BMSCs 中 miR-200c 和 Id1 mRNA 的表达情况；(3) 将 miR-200c-mimic、miR-200c-antagomir、si-Id1 和对比组分别转染到 BMSCs 中，利用 Western blot 检测 Id1 和成骨分化标志物 ALP 和 OCN 的表达情况；(4) 用 ALP 活性定量法检测 BMSCs 成骨分化的活性；(5) 使用 Alizarin 红染色检测 BMSCs 成骨分化程度。预期结果：(1) 在 BMSCs 中，miR-200c 表达水平下降，Id1 mRNA 表达水平升高；(2) miR-200c-mimic 转染组下调 Id1 蛋白表达水平，继而带动ALP 和 OCN 蛋白表达水平升高，促进 BMSCs 成骨分化；(3) miR-200c-antagomir 转染组上调 Id1 蛋白表达水平，带动ALP 和 OCN 蛋白表达水平下降，抑制 BMSCs 成骨分化；(4) si-Id1 转染组下调 Id1 蛋白表达水平，带动 ALP 和 OCN 蛋白表达水平下降，抑制 BMSCs 成骨分化。结论：miR-200c 靶向 Id1 表达水平，调节 BMSCs 成骨分化。这些讨论结果有助于深化了解 BMSCs 的成骨分化机制，为治疗骨代谢异常相关性疾病提供新的治疗途径。
