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取小鼠脑组织

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丁香园上面总结的方法,排版有点乱。 其实过程与大鼠近似,我的经验是: 1. 材料准备;大剪刀、眼科剪、眼科镊、大镊子、滤纸、竹签等; 2. 步骤:处死小鼠,取头颅; 剪开皮肤,漏出颅骨; 用大尖镊子夹住两侧眼眶,用眼科剪稍剪除颅骨中线; 再用眼科镊夹住颅骨从内向外夹,从下向上逐步去除颅骨; 当全脑露出时,再用眼科镊去除脑膜和血管; 然后用竹签从嗅球处向下取出全脑,即可。 3. 注意事项:用力轻柔,否则容易弄破脑部; 用剪刀剪颅骨时,一定要贴壁向上剪,否则容易剪破脑部; 去除脑膜时,不能硬拉,否则容易弄破大脑; 取出全脑时应把头顶朝下,用竹签轻轻取出,离桌面也不要太远、高; 若留病理,建议一定要取完整无损的大脑。 做免疫组化的话,稍微麻烦一点儿,因为脑组织含水量多,要固定的好,就需要先 灌 注。 先 麻醉 小鼠 剪开胸 腔 ,找 到 心 脏 ,从心 尖入 针 ,剪开右 心 耳 先 用生 理盐 水灌 注直 到 从心 耳 流 出来 的水清 亮 了 再改 用固定液 ( 一般 是4%多聚 甲 醛 ) 灌 注至 小鼠四 肢 僵 硬 小鼠只 需要用注射 器 就行 了 ,我做的25~ 35g 的小鼠一般 用 50mLNS+30mL 多聚 甲醛 。具 体 步骤:常 规 麻醉 小鼠,将 其固定,用剪刀剪开胸 部皮肤,暴 露出皮下组织,剪开时注意钝 性 分 离,以 免误 伤 。然后用镊子提 起 剑 突 ,用剪刀剪开胸 腔 ,剪断 两侧肋 骨,暴 露整个 胸 腔 ,小心 误 伤 肺 及 心 脏 、大血管。用镊子撕 开心 包 膜,暴 露心 脏 ,用眼科剪剪开右 心 耳 ,然后提 起 心 尖将 准备好的生 理盐 水注射 器 插 入左 心 室 ,注射 ,注射 时小心 针 头滑 脱 。生 理盐 水灌 流 至 肺 和肝 的颜 色 都 变 成 灰 白色 即可。然后用多聚 甲 醛 灌 流 ,针 孔 最 好是同 一个 ,多聚 灌 流 时小鼠四 肢 会 抽 搐 ,待 抽 搐 结束 ,小鼠僵 硬即可。取下小鼠,用剪刀在 颈 部离断 头颅,用剪刀在 小鼠头颅中间 皮肤剪一刀,将 两边 皮肤向下翻 用手 捏 住,暴 露整个 颅骨,用眼科剪从脊 髓 端 插 入 椎 孔 ,沿 着 颅正 中线剪开颅骨,注意剪刀向上翘 一些 ,以 免误 伤 脑组织,剪开后用弯 眼科镊分 离颅骨,小心 分 离,直 至 暴 露整个 大脑,然后用弯 镊伸入 颅底...

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