JIP3 基因敲除对 NAFLD 小鼠肝损伤的作用及机制讨论背景肥胖相关代谢性疾病,包括非酒精性脂肪肝病（NAFLD）,糖尿病和冠心病等患病率逐年上升,目前的治疗措施主要针对疾病的后果而不是代谢紊乱的原因。因此,探讨肥胖相关疾病的发病机制对于临床预防和治疗肥胖及相关代谢性疾病有很重要的指导意义。NAFLD 是指除酒精及其他明确肝损害因素所致的肝脂肪变性及脂代谢紊乱。NAFLD 发病的始动因素与肥胖和胰岛素抵抗密切相关,脂肪堆积在肝脏易引发氧化应激和脂质过氧化,从而诱发肝细胞损伤、炎症及纤维化,促进 NAFLD 进展。JNK 相互作用蛋白 3（JIP3）是 JIP 家族的一员,最初被认为是 c-Jun 氨基末端激酶（JNK）信号通路支架蛋白。JIP3 具有较强的形成异二聚体的能力,多面 JIP3 支架蛋白可以和 Toll 样受体（TLR）相关联,TLR 识别病原体特异性分子基序进而参加 NF-κB 和 MAPK 信号途径（包括 ERK1/2 和 JNK 等）的传导,参加细胞增殖、凋亡、神经元发育、递质运输等生理活动。目前关于 JIP3 的讨论主要集中在中枢神经系统,其是否可通过调控 NF-κB和 MAPK 信号通路影响 NAFLD 肝损伤和脂代谢目前尚不清楚。目的本讨论的目的是以 JIP3 基因敲除小鼠(JIP3-/-小鼠)为讨论对象,通过高脂饮食建立 NAFLD 模型,探讨 JIP3 对 NAFLD 小鼠肝损伤的作用及分子机制。方法将 6-8 周龄重 18-20g 的雄性小鼠(野生型和 JIP3-/-型)适应性喂养 1 周后,随机分成 4 组（n=12/组）:（1）正常饮食野生型组（WT/Con）;（2）正常饮食 JIP3-/-组(JIP3-/-/Con);（3）高脂饮食野生型组（WT/HFD）;（4）高脂饮食 JIP3-/-组(JIP3-/-/HFD)。总饲养时间为 16 周,饲养期间每周测量小鼠体重和血糖。12 周时,各组均随机取出 4 只进行血脂测定和 HE 染色,评估 NAFLD 模型建立是否成功。16 周末,禁食 12h 后进行 IPGTT 和 IPITT。次日,小鼠麻醉状态下通过双能 X 射线吸收测定法评估体脂含量,取肝组织保存在液氮中。培育 AML-12 细胞,将 JIP3siRNA 转染至 AML-12 细胞,将细胞分为四组:（1）正常对比组（con）;（2）高果糖组（HFr）;（3）高果糖 JIP3 沉默组（siJIP3）;（4）siRNA 对比组（siNC）。取静脉血行生化、激素检测;Western Blot 检测肝脏组织或细胞 p-NF-κB、p-JNK 等蛋白的表达;实时荧光定量 PCR 检测 IL-1β,TNF-α,IL-...
