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实验九蛙心搏、期外收缩和蛙类离心脏灌流实验报告

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华南师范大学实验报告 一、实验题目: 蛙心搏的观察与描记、期外收缩与代偿间歇和蛙类离体心脏灌流 二、实验仪器与材料: 蛙 3 只;常规手术器械、蛙板、蛙心夹、毁髓针等;秒表(手机秒表)、两个针头(针灸针)、双针形露丝刺激电极、张力换能器、支架、滑轮、双凹夹、Pow erLab 生理实验系统、蛙心插管(斯氏套管)、套管夹 药剂:0.65%NaCl 溶液,5%NaCl 溶液,2%CaCl2 溶液,1%KCl 溶液,1:5000 肾上腺素,1:10000 乙酰胆碱溶液,300U/ml 肝素溶液 三、实验方法: (一)蛙的心搏观察 1. 双毁髓,暴露蛙心脏:小心剪去心包膜。 2. 观察蛙心脏结构 3. 观察心搏过程,记录正常心跳次数 4. 斯氏第一结扎,观察记录静脉窦、心房和心室 5. 斯氏第二结扎,观察记录静脉窦、心房和心室 6. 重复步骤 1 制备另一个蛙心暴露,用于下面的心搏曲线实验 (二)蛙的心搏曲线与心电图记录 1. 连接实验装置:Pow erLab 刺激输出线接双针形刺激电极,张力换能器接通道 2,通道 3生物电输入线接针形电极 2. 用蛙心夹轻夹心尖连接张力换能器,可用滑轮,棉线适当延长点,角度放低 3. 开机,打开 chart 软件,分别设置 ch2 和 ch3 放大参数,设置刺激为单脉冲。 4. 针形电极插入蛙上下肢皮肤,连接通道 3 5. 观察正常的蛙心搏曲线和心电图记录。 (三)期外收缩与代偿间歇实验 1. 在方法二的基础上,将刺激电极放到心室部位,注意尽量不影响心脏的收缩舒张 2. 分别在心室的收缩期,舒张早期、中期和晚期给予适当强度单脉冲(阈上刺激),观察期外收缩和代偿间歇的发生。 3. 保存数据 4. 进入方法四,制备蛙的离体心脏灌流装置 (四)蛙离体心脏灌流装置 1. 双毁髓,暴露蛙的心脏,分辨连接蛙心脏的血管:动脉圆锥、左主动脉和右主动脉,静脉与静脉窦 2. 斯氏蛙心插管法:在左主动脉下穿线,离左右主动脉分支处(近动脉圆锥)2mm 结扎左主动脉,在左右主动脉下再穿一线打活结备用,准备好蛙心套管(任氏液+1 滴肝素溶液),在左主动脉的分支上部位剪一小斜口,将套管插入心室(收缩期),当看到血液冲进套管,液面上下移动,即可结扎动脉和套管。 (五)离体心脏灌流实验项目 1. 记录正常心搏曲线,准备好加药标记,以下实验过程中保持 chart 连续不停的记录 2. 滴加 0.65%NaCl 溶液并标记,观察到心搏明显变化后,吸去套管内溶液并同时做冲洗标记,用新鲜的任氏液清洗 2~3 次,...

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