电泳知识总结

1.电泳是指带电粒子在电场的作用下发生定向迁移（与其本身所带电荷相反的电极移动）的现象。利用电泳现象将多组分物质分离、分析的技术叫做电泳技术。 2.生物大分子在电场中移动的速度由什么决定？ 答：样品性质方面：粒子大小，形状，带电荷多少，带电性质；电泳条件方面：介质阻力，电场强度，溶液黏度。 3. 粒子的移动速度(泳动速度 V)与电场强度(E)、粒子所带电荷量(Q)成正比，而与粒子半径(r)及溶液粘度(η )成反比。非球形分子（如线状 DNA）在电泳过程中受到更大的阻力，即粒子的泳动速度与粒子形状有关。 4.迁移率与下列（ D )因素无关？ A.电荷数量 B.粒子大小 C.溶液黏度 D.电场强度 电泳迁移率（/泳动度/淌度）μ μ = V/E = Q/6π rη 【影响迁移率的因素： 1. 待分离大分子的性质 ：所带的电荷、分子大小和形状，分子带的电荷量越大、直径越小、形状越接近球形，则其电泳迁移速度越快； 2. 缓冲液 pH 和离子强度：pH 值距 pI 愈远，Q 越大，V 越大 ；pH 过高或过低☞蛋白变性☞缓冲液；缓冲液通常要保持一定的离子强度；离子强度过低或过高的不利影响； 3. 电场强度：E 高，带电颗粒泳动快。过高，产生焦耳热，样品和 Bu ffer 扩散增加，条带增宽；蛋白变性。过低，电泳时间增加，扩散。当需要增大电场强度以缩短电泳时间时，需附有冷却装置； 4. 电渗 ：在 电场中液体对固体支持物的相对移动；当电渗方向与电泳方向一致时，会加快颗粒泳动速度，反之，当两者方向相反时，会减慢颗粒泳动速度； 5. 支持介质：筛孔越小，则颗粒在移动的过程中所受到的阻力也就越大；介质的纯度影响聚焦效果；介质的非特异性吸附会增大电渗。】 5.等电点的定义？蛋白质在等电点时有哪些特点？ 答：当溶液的pH 为一定数值时，其中的蛋白质正负电荷相等，即净电荷为零，此时的pH值就是该蛋白质等电点 pI。蛋白质在等电点时的溶解度最小。 6.下列不是区带电泳的是（ C ） A.纸电泳 B.醋酸纤维素薄膜电泳 C. 等电聚焦电泳 D.聚丙烯酰胺凝胶电泳 7.等电聚焦与等速电泳的差别？ 答：区带窄，分辨率高。 自由界面电泳：部分分离 8 .电渗现象：外加电场作用下，与固体支持物接触的液体层发生移动的现象。 电渗流：电渗现象中液体的整体流动。是毛细管电泳分离的主要驱动力，是毛细管中的溶剂因轴向直流电场作用发生的定向流动。其大小直接影响分析结果的精确度，准确度。 9 .（凝胶电泳）...