科学家将人的生长激素基因与大肠杆菌的DNA分子进行重组

科学家将人的生长激素基因与大肠杆菌的DNA 分子进行重组，并成功地在大肠杆菌中得以表达。但在进行基因工程的操作过程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒，便于重组和筛选。已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—，请据图回答： (1)过程①所需要的酶是________。 (2)在构建基因表达载体的过程中，应用限制酶______切割质粒，用限制酶______切割目的基因。用限制酶切割目的基因和载体后形成的黏性末端通过__________________原则进行连接。人的基因之所以能与大肠杆菌的DNA 分子进行重组，原因是 ________________________________________________________________________。 (3) 在过程③ 中一 般 将受 体 大肠杆菌用________________ 进行处 理 ，以增 大____________的通透性，使含有目的基因的重组质粒容易进入受体细胞。 (4)将得到的大肠杆菌B 涂布在一个含有氨苄青霉素的培养基上，得到如图 a 所示的结果 ( 圆 点 表示 菌落 ) ，该 结 果 说 明 能 够 生长的大肠杆菌中已导 入 了____________________，反之则没有导入；再将灭菌绒布按到培养基a 上，使绒布表面沾上菌落，然后将绒布按到含四环素的培养基上培养，得到如图 b 所示的结果(圆圈表示与图 a 中培养基上对照无菌落的位置)。与图 b 圆圈相对应的图 a 中的菌落表现型是__________________________，这些大肠杆菌中导入了________________。 (5)人体的生长激素基因能在大肠杆菌体内成功表达是因为______________________。目的基因导入大肠杆菌中后表达的过程是______________________________________。 答案 (1)逆转录酶 (2)Ⅰ Ⅱ 碱基互补配对 人的基因与大肠杆菌DNA 分子的双螺旋结构相同 (3)CaCl2 溶液 细胞壁 (4)普通质粒或重组质粒 抗氨苄青霉素而不抗四环素 重组质粒 (5)二者共用一套密码子 生长激素基因→m RNA→生长激素 解析 (1)目的基因的获取途径有三条，很明显，题图中是通过逆转录法来获取目的基因的，过程①所需要的酶应是逆转录酶。(2)根据限制酶Ⅰ的识别序列和切点为“—G↓GATCC—”、限制酶Ⅱ的识别序列和切点为“—↓GATC—”，结合图示质粒及目的基因上的相关碱基序列推知，在构建基因表达载体的过程中，应用限制酶Ⅰ切割质粒，用限制酶Ⅱ切割目的基因。人的生长激素基因与大肠杆菌的 DNA 分子可以进行重组，说明人的基因与大肠杆菌 D...