生物化学实验报告 姓 名： 学 号： 专业年级： 组 别： 生物化学与分子生物学实验教学中心 实验名称 肝糖原的提取、鉴定与定量 实验日期 实验地点 合作者 指导老师 评分 XX 教师签名 李某某 批改日期 2013-06-03 格式要求：正文请统一用：小四号，宋体，1.5 倍行距；数字、英文用 Times New Roman；标题用：四号，黑体，加粗。需强调的地方请用蓝颜色标出。不得出现多行、多页空白现象。 一、实验目的 1、掌握组织样品的制备方法，了解其注意事项。 2、了解肝糖原提取、糖原和葡萄糖鉴定与蒽酮比色测定糖原含量的原理和注意事项，掌握其操作方法。 3、正确操作使用刻度吸管和可调微量取液器。 4、熟练运用溶液混匀的各种方法。 5、正确掌握溶液转移的操作。 6、正确操作使用分光光度计。 二、实验原理 1、肝糖原的提取与鉴定 糖原储存于细胞内，采用研磨匀浆等方法可使细胞破碎，低浓度的三氯醋酸能使蛋白质变性，破坏肝组织中的酶且沉淀蛋白质，而糖原仍稳定地保存于上清液中，从而使用糖原与蛋白质等其它成分分离开来。糖原不溶于乙醇而溶于热水，故先用 9 5 ％乙醇将滤液中糖原沉淀，再溶于热水中。 糖原水溶液呈乳样光泽，遇碘呈红棕色。这是糖原中葡萄糖长链形成的螺旋中， 依 靠 分 子 间 引 力 吸 附 碘 分 子 后 呈 现 的 颜 色 。 糖 原 还 可 被 酸 水 解 为 葡 萄 糖 ， 利 用 呈 色 反 应和 葡 萄 糖 的 还 原 性 ， 可 判 定 肝 组 织 中 糖 原 的 存 在 。 CuSO4 十 2NaOH = Na2SO4+Cu(OH)2↓ 2Cu(OH)2 十 C6H12O6 = 2CuOH 十 氧 化 型 葡 萄 糖 +H2O 2CuOH = Cu2O↓(红 色 )+H2O Cu(OH)2= CuO↓(黑 色 )+H2O 2、 肝 糖 原 定 量 测 定 糖 原 在 浓 酸 中 可 水 解 成 为 葡 萄 糖 ， 浓 硫 酸 能 使 葡 萄 糖 进 一 步 脱 水 生 成 糠 醛 衍 生 物 —— 5-羟 甲 基 呋 喃 甲 醛 ， 此 化 合 物 再 与 蒽 酮 脱 水 缩 合 生 成 蓝 色 的 化 合 物 。 该 物 质 在 620nm处 有 最 大 吸 收 。 糖 含 量 在 (10~100)g 范 围 内 ， 溶 液 颜 色 的 深 浅 与 可 溶 性 糖 含 量 成 正 比 。利 用 此 反 应 与 同 样 处 理 的 已 知 葡 萄 糖 含 量 标 准 溶 液 ...
