专题五遗传的分子基础时间 2024—2-24第二部分 基因工程一、考纲要求：1、基因工程的诞生（Ⅰ）2、基因工程的原理及技术（含 PCR 技术）(Ⅱ）3、基因工程的应用（Ⅱ）4、蛋白质工程(Ⅰ）二、知识网络：三、课本填空：【基因工程的概念】基因工程是指根据人们的愿望，进行严格的设计,通过体外 DNA 重组和转基因技术 ，给予生物以新的遗传特性，制造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因工程是在 DNA 分子水平 上进行设计和施工的，又叫做 DNA 重组技术 。基因工程的原理是（一)基因工程的基本工具：限制酶、DNA 连接酶、载体1。“分子手术刀"-—限制性核酸内切酶（简称为限制酶 ) （1)来源:主要是从中分离纯化出来的。（真核生物中也有，如：酵母菌）(2)功能:能够识别双链 DNA 分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的断开,因此具有专一性. 大多数限制酶的识别序列由 6 个核苷酸组成，少数也有 4、5、8 个组成。(3）结果:经限制酶切割产生的 DNA 片段末端通常有两种形式：和。2。“分子缝合针”-—DNA 连接酶 （1)两种 DNA 连接酶（DNA 连接酶和 DNA 连接酶)的比较：① 相同点：都缝合磷酸二酯键。② 不同点：E·coliDNA 连接酶来源于大肠杆菌，只能将双链 DNA 片段互补的 末端之间的磷酸二酯键连接起来；而 T4DNA 连接酶来源于 T4 噬菌体，能缝合两种末端，但连接平末端的之间的效率较低.（2）与 DNA 聚合酶作用的异同:DNA 聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端,形成磷酸二酯键。DNA连接酶是连接两个 DNA 片段 的末端,形成磷酸二酯键。3.“分子运输车"-—载体（1）载体具备的条件：①能在受体细胞中，或整合到染色体 DNA 上,随染色体 DNA 进行同步复制。② 具有一至多个,供外源 DNA 片段插入.③ 具有，供重组 DNA 的鉴定和选择。（注意：标记基因不一定都是抗性基因）(2)最常用的载体是，它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌拟核 DNA 之外，并具有自我复制能力的双链状 DNA 分子。（天然质粒常需进行人工改造）（3）其它载体: 、（二）基因工程的基本操作程序：基因工程的操作程序主要包括四个步骤:、、、第一步:目的基因的猎取1。目的基因主要是指： 编码的结构基因 。也可以是一些具有.2。目的基因可以从已有的物种中分离出来，也可以用人工的方法合成。原核基因常实行直接分离获得,真核基因常采纳人工合成。3....
