专题五遗传的分子基础时间 2024—2-24第二部分 基因工程一、考纲要求:1、基因工程的诞生(Ⅰ)2、基因工程的原理及技术(含 PCR 技术)(Ⅱ)3、基因工程的应用(Ⅱ)4、蛋白质工程(Ⅰ)二、知识网络:三、课本填空:【基因工程的概念】基因工程是指根据人们的愿望,进行严格的设计,通过体外 DNA 重组和转基因技术 ,给予生物以新的遗传特性,制造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品
基因工程是在 DNA 分子水平 上进行设计和施工的,又叫做 DNA 重组技术
基因工程的原理是(一)基因工程的基本工具:限制酶、DNA 连接酶、载体1
“分子手术刀"-—限制性核酸内切酶(简称为限制酶 ) (1)来源:主要是从中分离纯化出来的
(真核生物中也有,如:酵母菌)(2)功能:能够识别双链 DNA 分子的某种特定的核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的断开,因此具有专一性
大多数限制酶的识别序列由 6 个核苷酸组成,少数也有 4、5、8 个组成
(3)结果:经限制酶切割产生的 DNA 片段末端通常有两种形式:和
“分子缝合针”-—DNA 连接酶 (1)两种 DNA 连接酶(DNA 连接酶和 DNA 连接酶)的比较:① 相同点:都缝合磷酸二酯键
② 不同点:E·coliDNA 连接酶来源于大肠杆菌,只能将双链 DNA 片段互补的 末端之间的磷酸二酯键连接起来;而 T4DNA 连接酶来源于 T4 噬菌体,能缝合两种末端,但连接平末端的之间的效率较低
(2)与 DNA 聚合酶作用的异同:DNA 聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端,形成磷酸二酯键
DNA连接酶是连接两个 DNA 片段 的末端,形成磷酸二酯键
“分子运输车"-—载体(1)载体具备的条件:①能在受体细胞中,或整合到染色体 DNA 上,随染色体 DNA 进行同步复制
② 具有一至多个,供