1. 微生物代谢工程定义、讨论内容和讨论手段.定义：通过某些特定生化反应的修饰来定向改善细胞的特性功能，运用重组 DNA 技术来制造新的化合物。讨论内容:生物合成相关代谢调控和代谢网络理论;代谢流的定量分析;代谢网络的重新设计;中心代谢作用机理及相关代谢分析；基因操作。讨论手段：代谢工程综合了基因工程、微生物学、生化工程等领域的最新成果.因此，在讨论方法和技术方面主要有下列三大常用手段：(1）检测技术:常规的化学和生物化学检测手段都可用于代谢工程的讨论，如物料平衡、同位素标记示踪法、酶促反应动力学分析法、光谱学法、生物传感器技术。（2)分析技术：采纳化学计量学、分子反应动力学和化学工程学的讨论方法并结计算机技术,阐明细胞代谢网络的动态特征与控制机理,如稳态法、扰动法、组合法和代谢网络优化等。（3） 基因操作技术：在代谢工程中，代谢网络的操作实质上可以归结为基因水平上的操作:涉及几乎所有的分子生物学和分子遗传学实验技术，如基因和基因簇的克隆、表达、调控,DNA 的杂交检测与序列分析，外源 DNA 的转化，基因的体内同源重组与敲除，整合型重组 DNA 在细胞内的稳定维持等。2. 代谢改造思路和代谢设计原理。代谢改造思路：根据微生物的不同代谢特性,常采纳改变代谢流、扩展代谢途径和构建新的代谢途径三种方法.（1）改变代谢途径的方法：加速限速反应,增加限速酶的表达量，来提高产物产率.改变分支代谢途径流向，提高代谢分支点某一分支代谢途径酶活力，使其在与其它的分支代谢途径的竞争中占据优势，从而提高目的代谢产物的产量。（2)扩展代谢途径的方法：在宿主菌中克隆和表达特定外源基因，从而延伸代谢途径,以生产新的代谢产物和提高产率。扩展代谢途径还可使宿主菌能够利用自身的酶或酶系消耗原来不消耗的底物。（3）转移或构建新的代谢途径:通过转移代谢途径、构建新的代谢途径等方法来实现。代谢设计原理：现存代谢途径中改变增加目的产物代谢流：增加限速酶编码基因的拷贝数；强化关键基因的表达系统；提高目标途径激活因子的合成速率；灭活目标途径抑制因子的编码基因；阻断与目标途径相竟争的代谢途径;改变分支代谢途径流向；构建代谢旁路;改变能量代谢途径；在现存途径中改变物流的性质：利用酶对前体库分子结构的宽容性；通过修饰酶分子以拓展底物识别范围；在现存途径基础上扩展代谢途径：在宿主菌中克隆、表达特定外源基因可以延伸代谢途径，从而生产新的代谢产物、提高产率.3. ...
