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微生物实验室培养基适用性操作规程

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微生物实验室培养基适用性操作规程建立培养基适用性检查操作规程,保证培养基的质量,确保检验结果的准确性。本规程规定了培养基适用性检查方法和操作要求,适用于微生物实验室计数用培养基、控制菌检查用培养基的适用性检查。1、简述1.1 培养基适用性检查试验可用于确定实验室所使用培养基(包括购置的不同批号的成品培养基、不同批号的脱水培养基、按处方自行配制培养基所用不同批次的原材料等)、制备程序(包括水质控制、配制方法、灭菌程序等)、保存条件(温度、湿度、时间及盛装培养基的容器条件等)等是否满足微生物限度检查要求。1.2 计数用培养基适用性检查包括需氧菌、霉菌及酵母菌总数计数。1.3 控制菌检查用培养基适用性检查包括促生长能力、抑制能力及指示特性的检查。2 计数用培养基适用性检查微生物限度检查中计数用培养基有 5 种,胰酪大豆胨琼脂培养基、沙氏葡萄糖琼脂培养基、R2A 琼脂培养基、平板计数培养基。2. 1 培养基及配制2. 1.1 培养基:胰酪大豆胨琼脂培养基、胰酪大豆胨琼脂对照培养基;沙氏葡萄糖琼脂培养基、沙氏葡萄糖琼脂对照培养基;R2A 琼脂培养基、R2A 琼脂对照培养基;平板计数培养基。2.1.2 配制:照《培养基配制标准操作规程》配制。2.2 试剂及稀释剂配制2. 2.1 试剂:pH7.0 氯化钠-蛋白胨缓冲液、聚山梨酯 80、氯化钠。2.2.2 稀释剂配制A・pH7.0 无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液:称取 pH7.0 无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液14.63g,加水 lOOOmL 溶解,分装,灭菌(121°C、15min)。>■0.05%(mL/mL)聚山梨酯 80 的 pH7.0 无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液:取已经灭菌好的聚山梨酯 80(1mL),加入 pH7.0 无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液,摇匀,即得。>■0.9%无菌氯化钠溶液:称取氯化钠 9.0g,加水溶解使成 1000mL,分装,灭菌(121C、15min)。3 试剂及消毒液配制3. 1 试剂新洁尔灭溶液、84 消毒液、苯酚、75%医用消毒酒精。3.2 消毒液配制3. 2.184 消毒液:取 84 消毒液 1ml,加水 60ml(1:60),摇匀即得。3.2.20.1%新洁尔灭溶液:取新洁尔灭溶液 20.4ml,加水至 1000ml,摇匀,即得。3. 2.35%的苯酚溶液:称取苯酚 5g,加水至 100ml,摇匀,即得。3.2.475%酒精棉球:取灭菌脱脂棉撕成小块并揉捏成团,置于广口瓶内,加入 75%医用消毒酒精,充分浸润,即得。4 试验用菌株及菌液制备4. 1 试验用菌株金黄色葡萄球菌(StaphylococcusaureuS[CMCC(B)26003]铜绿假单胞菌(Pseudomona...

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