课题 5 DNA 的粗提取与鉴定 学习目标1
尝试对植物或动物组织中的 DNA 进行粗提取2
了解 DNA 的物理化学性质3
理解 DNA 粗提取以及 DNA 鉴定的原理学习重点与难点DNA 的粗提取和鉴定方法自主学习一基础知识1.提取 DNA 的方法提取生物大分子的基本思路是
对于 DNA 的粗提取而言,就是要利用 DNA 与 、 和 等在物理和化学性质方面的差异,提取 DNA,去除其他成分
1)DNA 的溶解性 DNA 和蛋白质等其他成分在不同浓度的 中溶解度不同,利用这一特点,选择适当的盐浓度就能使 充分溶解,而使杂质沉淀,或者相反,以达到分离目的
课本图 5—1 是 DNA 在 NaCl 溶液中的溶解度曲线,请根据曲线图,【思考】①在什么浓度下,DNA 的溶解度最小
DNA 在 NaCl 溶液中的溶解度是如何变化的
② 如何通过控制 NaCl 溶液的浓度使 DNA 在盐溶液中溶解或析出
此外,DNA 不溶于 溶液,但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精
利用这一原理,可以将 DNA 与蛋白质进一步的分离
2)DNA 对酶、高温和洗涤剂的耐受性 蛋白酶能水解 ,但是对 没有影响
大多数蛋白质不能忍受 60—80oC 的高温,而 DNA 在 以上才会变性
洗涤剂能够瓦解 ,但对 DNA 没有影响
3)DNA 的鉴定 在 条件下,DNA 遇 会被染成 色,因此二苯胺可以作为鉴定 DNA 的试剂
2.实验设计1 ) 实 验 材 料 的 选 取 凡 是 含 有 的 生 物 材 料 都 可 以 考 虑 , 但 是 选 用 的生物组织,成功的可能性更大
在下面的生物材料中选取适合的实验材料:鱼卵、猪肝、菜花(花椰菜)、香蕉、鸡血、哺乳动物的红细胞、猕猴桃、洋葱、豌豆、菠菜、在液体培养基的大肠杆菌【思考】哺乳动物的红细胞的特点
2)破碎细胞,获取含 DNA 的滤液 动物细胞的破碎比较