高中生物基因工程核心知识点 基因工程这部分内容在高中生物必修 2 及选修 3 教材中都有出现,我们需要掌握哪些相关核心知识点?下面是我给大家带来的高中生物基因工程核心知识点,希望对你有帮助。 高中生物基因工程核心知识点 基因工程的概念 基因工程是指根据人们的愿望,进行严格的设计,通过体外 DNA 重组和转基因技术,给予生物以新的遗传特性,制造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因工程是在DNA 分子水平上进行设计和施工的,又叫做 DNA 重组技术。 (一)基因工程的基本工具 1.“分子手术刀”——限制性核酸内切酶(限制酶) (1)来源:主要是从原核生物中分离纯化出来的。 (2)功能:能够识别双链 DNA 分子的某种特定的核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开,因此具有专一性。 (3)结果:经限制酶切割产生的 DNA 片段末端通常有两种形式:黏性末端和平末端。 2.“分子缝合针”——DNA 连接酶 (1)两种 DNA 连接酶(E coliDNA•连接酶和 T4-DNA 连接酶)的比较: ① 相同点:都缝合磷酸二酯键。 ② 区别:E coliDNA•连接酶来源于 T4 噬菌体,只能将双链DNA 片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来;而 T4DNA连接酶能缝合两种末端,但连接平末端的之间的效率较低。 (2)与 DNA 聚合酶作用的异同:¬¬¬¬¬¬¬¬¬¬¬¬¬¬¬DNA¬¬¬¬¬¬¬聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端,形成磷酸二酯键。DNA 连接酶是连接两个 DNA 片段的末端,形成磷酸二酯键。 3.“分子运输车”——载体 (1)载体具备的条件:①能在受体细胞中复制并稳定保存。 ② 具有一至多个限制酶切点,供外源 DNA 片段插入。 ③ 具有标记基因,供重组 DNA 的鉴定和选择。 (2)最常用的载体是¬¬质粒,它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌染色体之外,并具有自我复制能力的双链环状 DNA分子。 (3)其它载体:噬菌体的衍生物、动植物病毒 (二)基因工程的基本操作程序 第一步:目的基因的猎取 1.目的基因是指:编码蛋白质的结构基因。 2.原核基因实行直接分离获得,真核基因是人工合成。人工合成目的基因的常用方法有反转录法_和化学合成法_。 3.PCR 技术扩增目的基因 (1)原理:DNA 双链复制 (2)过程:第一步:加热至 90~95℃DNA 解链;第二步:冷却到 55~60℃,引物结合到互补 DNA 链;第三步:加热至 70~75℃,热稳定 DNA 聚合酶从...