实验一 微生物培育基得制备与灭菌(８课时）一、目得要求1、学习配制微生物培育基得一般方法与步骤。2、掌握高压蒸汽灭菌得原理与操作方法。二、基本原理 正确掌握培育基得配制方法就是从事微生物学实验工作得重要基础。由于微生物种类及代谢类型得多样性，因而用于培育微生物得培育基得种类也很多，它们得配方及配制方法虽各有差异,但一般培育基得配制程序却大致相同,例如器皿得准备，培育基得配制与分装,棉塞得制作，培育基得灭菌,斜面与平板得制作以及培育基得无菌检查等基本环节大致相同.三、实验材料1、药品：牛肉膏蛋白胨培育基、琼脂粉、１ｍｏ l/Ｌ得 Na Ｏ H 与１ mo ｌ/L HCl 溶液。２、仪器及玻璃器皿：电子天平、高压蒸汽灭菌锅、超净工作台、酒精灯、移液管、试管、烧杯、量筒、三角瓶、培育皿与玻璃棒等.３、其她物品:药匙、称量纸、pH 试纸、记号笔、棉花、报纸、线绳与注射器等。四、操作步骤(一）玻璃器皿得洗涤玻璃器皿在使用前必须用洗涤剂洗刷洁净,然后用自来水冲净，置于烘箱中烘干后备用。（二）牛肉膏蛋白胨培育基得配制1、培育基配制（１)称量：按培育基配方计算出各成分得用量，然后用电子天平进行准确称量后倒入一烧杯中.注意:称量药品时，一定要用称量纸而不能用滤纸。称药品用得药匙不要混用，称完药品应及时盖紧瓶盖。（2）溶解:用量筒称量所需体积得水（根据实验需要可用自来水或蒸馏水)，倒入烧杯中,用玻璃棒搅动溶解即可。(3）调ｐ H：一般用 p Ｈ试纸测定培育基得 pH，可用 1m ｏ l/Ｌ N ａ OH 或1mol/L H Ｃ l 溶液进行调节。调节ｐ H 时,应逐滴加入 NaOH 或 H Ｃ I 溶液,防止局部过酸或过碱,破坏培育基中成分.边加边搅拌,并不时用 PH 试纸测试,直至达到所需ｐ H 为止。注意：pH 值不要调过头，以免回调而影响培育基内各离子得浓度。2、制备液体培育基（1)用量筒准确量取 2 ０ m ｌ培育基，倒入 100 ｍ l 三角瓶中，塞好棉塞，用报纸包好瓶口并用棉线包扎好，灭菌。注意:倒溶液时不要把瓶口沾湿。包扎时不要把瓶子弄倒而把棉塞弄湿。3、制备固体培育基（1)平板培育基Ａ、用量筒准确量取 100ml 培育基，倒入２５ 0ml 三角瓶中，加入２ g 琼脂粉,塞好棉塞,用报纸包好瓶口并用棉线包扎好,灭菌.Ｂ、将洗净烘干得培育皿用报纸包扎好，灭菌。C、在超净工作台中,将装在三角瓶中已灭菌得琼脂培育基冷至５０℃左右倾入无菌培育皿中.温度过高时,皿盖上得冷凝水太多...
