实验一 微生物培育基得制备与灭菌(8课时)一、目得要求1、学习配制微生物培育基得一般方法与步骤
2、掌握高压蒸汽灭菌得原理与操作方法
二、基本原理 正确掌握培育基得配制方法就是从事微生物学实验工作得重要基础
由于微生物种类及代谢类型得多样性,因而用于培育微生物得培育基得种类也很多,它们得配方及配制方法虽各有差异,但一般培育基得配制程序却大致相同,例如器皿得准备,培育基得配制与分装,棉塞得制作,培育基得灭菌,斜面与平板得制作以及培育基得无菌检查等基本环节大致相同
三、实验材料1、药品:牛肉膏蛋白胨培育基、琼脂粉、1mo l/L得 Na O H 与1 mo l/L HCl 溶液
2、仪器及玻璃器皿:电子天平、高压蒸汽灭菌锅、超净工作台、酒精灯、移液管、试管、烧杯、量筒、三角瓶、培育皿与玻璃棒等
3、其她物品:药匙、称量纸、pH 试纸、记号笔、棉花、报纸、线绳与注射器等
四、操作步骤(一)玻璃器皿得洗涤玻璃器皿在使用前必须用洗涤剂洗刷洁净,然后用自来水冲净,置于烘箱中烘干后备用
(二)牛肉膏蛋白胨培育基得配制1、培育基配制(1)称量:按培育基配方计算出各成分得用量,然后用电子天平进行准确称量后倒入一烧杯中
注意:称量药品时,一定要用称量纸而不能用滤纸
称药品用得药匙不要混用,称完药品应及时盖紧瓶盖
(2)溶解:用量筒称量所需体积得水(根据实验需要可用自来水或蒸馏水),倒入烧杯中,用玻璃棒搅动溶解即可
(3)调p H:一般用 p H试纸测定培育基得 pH,可用 1m o l/L N a OH 或1mol/L H C l 溶液进行调节
调节p H 时,应逐滴加入 NaOH 或 H C I 溶液,防止局部过酸或过碱,破坏培育基中成分
边加边搅拌,并不时用 PH 试纸测试,直至达到所需p H 为止
注意:pH 值不要调过头,以免回调而影响培育基内各离子得浓度
2、制备液体培育基(1)用量