分子诊断的临床应用

分子诊断的临床应用基因分析，即基因诊断 ( Gene Diagnosis )： 是利用 DNA 分析技术直接从基因水平 ( DNA or RNA ) 检测遗传病的基因缺陷。这种方法和传统的诊断方法主要差别在于直接从基因型推断表型，可以越过基因产物，直接检测基因的结构而作出诊断，改变了传统的表型诊断方式，所以又称为逆向诊断 ( Reverse Diagnosis )。基因诊断的优点：材料容易获得，不受细胞类型的限制；不受基因表达的时空限制。不受年龄的限制；可以于发病前做出诊断；方便有效，迅速准确，携带者也可以有效检出。基因诊断的难点：对大多数疾病尚未找到合适的基因诊断方法，另外由于遗传异质性、基因突变的多样性，一种基因诊断方法对同一疾病往往有很大差异。 基因诊断的对象：一般是指单基因病和某些有主基因改变的多基因病。 至 1997 年，发现人类单基因病遗传病已达 8587 种，现已达到 15988 种进行基因诊断必须具备的条件：(1)致病基因的染色体定位已明确(2)致病基因的结构、顺序与突变性质巳清楚(3)致病基因与 DNA 多态存在连锁关系根据所具备的条件选择适合的基因诊断技术基因诊断方法目前常用的基因诊断方法: (1)聚合酶链反应 DNA 扩增法 (2)限制性酶谱 Southern 印迹杂交直接分析法 (3)限制性片段长度多态性(RFLP)连锁分析法 (4)寡核苷酸探针(oligonucleotide probe)检测法 (5)DNA 测序 (6)基因芯片一、基因检测在感染性疾病中的应用（一）肝炎病毒基因的检测 1、临床价值主要体现在：病情评估 血清中病毒含量的多少与肝脏病理损害程度相关，病毒载量越高，肝组织炎症反应程度越重。疗效预测 治疗前病毒核酸载量越高，疗效越差；载量越低，机体清除病毒的可能性越大。 预后推断病毒核酸载量持续处于高浓度者预后不良。垂直传播途径感染者，预后较差。反映肝细胞损害的其它指标正常，但病毒核酸 水平常常波动者更易进展为肝硬化。 2、乙肝 HBV-DNA 定量检测的临床诊断意义荧光定量 PCR:为乙肝病毒的检测诊断提供了新手段，大量临床标本测定结果证明，其特异性为 100％，灵敏度可达 0.01fg（10-12mg），相当于 2.5 个乙肝病毒颗粒。荧光定量 PCR 对下列情况更具有独特的诊断价值： 1）.治疗前进行病毒定量检测，可以指导选择对症药品，避开盲目用药。 2）.治疗后定量 PCR 可直接准确地测定体内病毒数量，有助于疗效的推断。 3）.怀孕前进行定量 PCR 测定，有助于选择有利的怀孕时机。乙肝孕妇进...