专题五 遗传的分子基础时间 2025—2—24第二部分 基因工程一、考纲要求：1、基因工程的诞生（Ⅰ）2、基因工程的原理及技术（含 PCR 技术）（Ⅱ） 3、基因工程的应用（Ⅱ)4、蛋白质工程（Ⅰ） 二、知识网络:三、课本填空：【基因工程的概念】基因工程是指根据人们的愿望，进行严格的设计，通过体外 DNA 重组和转基因技术 ，给予生物以新的遗传特性,制造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因工程是在 DNA 分子水平 上进行设计和施工的，又叫做 DNA 重组技术 。基因工程的原理是 （一）基因工程的基本工具：限制酶、DNA 连接酶、载体1。“分子手术刀”——限制性核酸内切酶 ( 简称为限制酶） （1）来源：主要是从 中分离纯化出来的.（真核生物中也有，如：酵母菌）（2）功能：能够识别双链 DNA 分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的 断开,因此具有专一性。 大多数限制酶的识别序列由 6 个核苷酸组成，少数也有 4、5、8 个组成。（3)结果：经限制酶切割产生的 DNA 片段末端通常有两种形式: 和 。2.“分子缝合针"-—DNA 连接酶 (1）两种 DNA 连接酶（ DNA 连接酶和 DNA 连接酶）的比较：① 相同点：都缝合磷酸二酯键。② 不同点：E·coliDNA 连接酶来源于大肠杆菌，只能将双链 DNA 片段互补的 末端之间的磷酸二酯键连接起来;而 T4DNA 连接酶来源于 T4 噬菌体，能缝合两种末端，但连接平末端的之间的效率较低。(2）与 DNA 聚合酶作用的异同:DNA 聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端,形成磷酸二酯键。DNA 连接酶是连接两个DNA 片段 的末端,形成磷酸二酯键。3。“分子运输车”-—载体（1）载体具备的条件：①能在受体细胞中 ,或整合到染色体 DNA 上，随染色体 DNA 进行同步复制。② 具有一至多个 ,供外源 DNA 片段插入。③ 具有 ,供重组 DNA 的鉴定和选择。（注意:标记基因不一定都是抗性基因）（2)最常用的载体是 ,它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌拟核 DNA 之外,并具有自我复制能力的双链 状 DNA 分子。(天然质粒常需进行人工改造）（3）其它载体： 、 (二)基因工程的基本操作程序： 基因工程的操作程序主要包括四个步骤: 、 、 、 第一步：目的基因的猎取1.目的基因主要是指： 编码 的结构基因 。也可以是一些具有 .2。目的基因可以从已有的物种中分离出来，也可以用人工的方法合成。原...
