高中生物 第2章 酶技术 第6课时 酶活力的测定同步备课教学案 北师大版选修1-北师大版高二选修1生物教学案VIP专享

第 6 课时 酶活力的测定[学习导航] 1.阅读教材 P33、P35内容，了解酶活力和酶反应速度的关系。2.结合教材 P32～33内容，检测果胶酶的活力。3.结合教材 P34内容，探究果胶酶作用的最佳条件。[重难点击] 1.解释果胶酶活力测定原理及方法。2.探究果胶酶作用的最佳条件。一、检测果胶酶的活力不同条件下，酶的活性是不同的，要定量地比较酶活力的差别就要进行酶活力的测定。结合教材实验，完成下面的探究内容。1.酶活力单位及其测定方法(1)酶活力单位是指在一定条件下，1 min 内能转化 1 μmol 底物的酶量。测定过程中温度保持在 25 ℃，其他条件如 pH 和底物浓度等均应采用最适条件。(2)测定方法① 一是测定完成一定量反应所需的时间，所需时间越短，说明酶活力越高；反之，酶活力越低。② 二是测定在一定条件下所催化的某一化学反应的反应速度，酶催化的反应速度越大，说明酶活力越高；反之，酶活力越低。2.果胶酶活力的测定(1)实验原理果胶酶可将果胶水解生成 β 半乳糖醛酸 ，产物可用次碘酸钠法进行定量测定，从而计算出果胶酶的活力。(2)方法步骤步骤操作提示① 保温两个锥形瓶，1 号瓶内加入果胶、果胶酶；2 号瓶内加入等量的果胶和蒸馏水，均用冰乙酸将 pH 调至 3.5，放在恒温水浴锅中 50 ℃保温 2 h保温的目的是使酶对底物很好地发挥作用，温度和 pH 都应是最适宜的② 加碘氧化从 1、2 号瓶中分别取 5 mL 反应液加入两个碘量瓶中，加热煮沸，冷却后分别加入1 mL 1mol/L 的碳酸钠溶液和 5 mL0.1 这一步的目的是在碱性条件下(碳酸钠提供碱性条件)，碘可以和果胶酶的水解产物 β 半乳 mol/L 的碘液，混匀糖醛酸作用，生成糖酸盐③ 滴定分别加入 2 mL1 mol/L 的硫酸，用 0.05 mol/L 硫代硫酸钠滴定至溶液呈淡黄色，再加入质量分数为 0.5%的淀粉指示剂，继续滴定至蓝色消失为止，记录所用硫代硫酸钠的体积，分别用 A 和 B 表示滴定时加入硫酸的目的是使酶促反应终止，然后用硫代硫酸钠滴定剩余的碘，根据化学反应中的定量关系即可求出半乳糖醛酸的量④ 计算酶活力(单位)＝(B－A)×M×1÷2×20÷5B 表示空白滴定所消耗的硫代硫酸钠毫升数；A 表示样品滴定消耗的硫代硫酸钠毫升数； M 表示硫代硫酸钠的摩尔浓度；1 表示 1 mol 硫代硫酸钠相当于 1 mol β 半乳糖醛酸 ；2表示作用时间；20 表示反应液总体积；5 表示检测时所取反应液的毫升数1.影响酶促反应速度的外界...