第33讲基因工程A组基础题组题组一基因工程的操作工具与操作程序1.(2018北京海淀期中)下列关于基因操作工具的叙述,正确的是()A.并非所有目的基因都可用PCR方法获取B.通常以抗生素合成基因作为标记基因C.限制酶识别并在特定位置断开氢键D.DNA连接酶可将脱氧核苷酸连接成长链答案A当目的基因的序列已知,并且分子量较小时,可以采用人工合成的方法或者PCR的方法获取;当目的基因的部分序列已知时,可采用PCR的方法获取;当分子量较大或序列未知时,可从基因文库中获取,A选项正确。通常以抗生素抗性基因作为标记基因,B选项错误。限制酶识别并在特定位点断开磷酸二酯键,C选项错误。DNA连接酶只能连接两个DNA片段,D选项错误。2.构建重组质粒时可选用四种限制酶,其识别序列如图。为防止酶切片段的自身环接,不可选用的限制酶组合是()A.①②B.②③C.①④D.③④答案C为防止酶切片段的自身环接,需要用不同的限制酶进行切割,而且不同的限制酶切割后产生的黏性末端要不同。限制酶①和②切割后产生的黏性末端不同,可选用,与题意不符,A错误;限制酶②和③切割后产生的黏性末端也不同,可选用,与题意不符,B错误;限制酶①和④切割后产生的黏性末端相同,不可选用,与题意相符,C正确;限制酶③和④切割后产生的黏性末端不同,可选用,与题意不符,D错误。3.下列有关人胰岛素基因表达载体的叙述,正确的是()A.表达载体中的胰岛素基因可通过人肝细胞mRNA反转录获得B.表达载体的复制和胰岛素基因的表达均启动于复制原(起)点C.借助抗生素抗性基因可将含胰岛素基因的受体细胞筛选出来D.启动子和终止密码子均在胰岛素基因的转录中起作用答案C由于人肝细胞中胰岛素基因不能表达,所以无法利用肝细胞mRNA反转录获得胰岛素基因,A项错误;表达载体的复制启动于复制原点,胰岛素基因的转录启动于启动子,B项错误;抗生素抗性基因是标记基因,作用是检测受体细胞中是否含有目的基因,从而将含有胰岛素基因的受体细胞筛选出来,C项正确;启动子是RNA聚合酶识别和结合的部位,是转录的起点,而终止密码子位于mRNA上,在翻译中起作用,D项错误。4.土壤农杆菌含有一个大型的Ti质粒(如图所示),在侵染植物细胞的过程中,其中的T-DNA片段转入植物的基因组。若想用基因工程并通过土壤农杆菌向某种植物中导入抗旱基因,以下分析不合理的是()A.若用Ti质粒作为抗旱基因的载体,目的基因的插入位置应该在T-DNA片段内,且要保证复制起始点和用于转移T-DNA的基因片段不被破坏B.将重组Ti质粒导入土壤农杆菌中时,可以用Ca2+处理细菌C.用含有重组Ti质粒的土壤农杆菌去感染植物细胞,可以通过植物组织培养成具有抗旱基因的植物D.若能够在植物细胞中检测到抗旱目的基因,则说明该基因工程项目获得成功答案D土壤农杆菌含有一个大型的Ti质粒,在侵染植物细胞的过程中,其中的T-DNA片段转入植物的基因组,所以若用Ti质粒作为抗旱基因的载体,目的基因的插入位置应该在T-DNA片段内,且要保证复制起始点和用于转移T-DNA的基因片段不被破坏,故A正确;将目的基因导入细菌时,需要用Ca2+处理细菌,使其成为易于吸收周围环境中DNA分子的感受态,故B正确;用含有重组Ti质粒的土壤农杆菌去感染植物细胞,再通过植物组织培养技术将受体细胞培养成具有抗旱基因的植物,故C正确;能够在植物细胞中检测到抗旱目的基因,只能说明目的基因导入成功,不能说明该基因工程项目获得成功,故D错误。题组二PCR技术、基因工程的应用与蛋白质工程5.(2018年北京朝阳一模)荧光定量PCR技术可定量检测样本中某种DNA含量。其原理是:在PCR体系中每加入一对引物的同时加入一个与某条模板链互补的荧光探针,当Taq酶催化子链延伸至探针处,会水解探针,使荧光监测系统接收到荧光信号,即每扩增一次,就有一个荧光分子生成。相关叙述错误的是()A.引物与探针均具特异性,与模板结合时遵循碱基互补配对原则B.Taq酶可以催化子链沿着3'→5'方向延伸,需dNTP作为原料C.反应最终的荧光强度与起始状态模板DNA含量呈正相关D.若用cDNA作模板,上述技术也可检测某基因的转录水平答案BTaq酶可以催化子链沿着5'→3'方向延伸,需dNTP作为原料,B选项错误;据题干信息“每扩增一次,就有一个荧光分子生成”推知,C、D选项正确。6.(2018北京西城期末)利用...
