生物选修3易考知识点背诵专题1基因工程基因工程的概念:基因工程是在DNA分子水平上操作的,又叫DNA重组技术
(一)基因工程的基本工具1
“分子手术刀”——限制性核酸内切酶(限制酶)(1)来源:主要是从原核生物中分离纯化出来的
(2)功能:能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开,因此具有专一性
(3)结果:经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式:黏性末端和平末端
“分子缝合针”——DNA连接酶(缝合磷酸二酯键)(2)与DNA聚合酶作用的异同:DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端,形成磷酸二酯键
DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端,形成磷酸二酯键
“分子运输车”——运载体(2)最常用的载体是质粒,它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌染色体之外,并具有自我复制能力的双链环状DNA分子
(3)其它载体:噬菌体、动植物病毒(二)基因工程的基本操作程序第一步:目的基因的获取1
基因文库获取;2、人工合成(逆转录法);3、PCR技术扩增目的基因(1)原理:DNA双链复制(2)过程:(变性)第一步:加热至90~95℃DNA解链;(复性)第二步:冷却到55~60℃,引物结合到互补DNA链;(延伸)第三步:加热至70~75℃,热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成
第二步:基因表达载体的构建1
组成:目的基因+启动子+终止子+标记基因第三步:将目的基因导入受体细胞_1
转化的概念:是目的基因进入受体细胞内,并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程
常用的转化方法:将目的基因导入植物细胞:采用最多的方法是农杆菌转化法,其次还有基因枪法和花粉管通道法等
将目的基因导入动物细胞:最常用的方法是显微注射技术
此方法的受体细胞多是受精卵
将目的基因导入微生物细胞:原核生物作为受体细胞的原因是繁殖快