检验科生化甘油三脂测定的标准操作规程VIP专享VIP免费

检验科生化甘油三脂测定的标准操作规程【目的】体外检测血清甘油三酯(TG)含量。【职责】1.实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP，室负责人监督落实。2.本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室负责人、科主任。【标本类型及实验前准备】1.受检者的准备病人空腹12h，不饮酒24h后采集血样。体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。注意有无应用影响测试项目的药物。此外，对于体检者，采血的季节都应做相关记录，因为样本中各项目的含量有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验。对于体检对象抽血前应有2周时间保持平时的饮食习惯，应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。2.静脉采血除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带。【仪器设备】东芝TBA-FX8全自动生化分析仪，低速离心机一、检测原理上海科华生物工程股份有限公司的甘油三酯试剂盒采用的是甘油磷酸氧化酶法脂蛋白脂肪酶甘油三酯HO甘油脂肪酸2甘油激酶甘油ATP甘油-3-磷酸ADP甘油磷酸氧化酶甘油-3-磷酸O磷酸二羟丙酮HO222过氧化物酶HO4氨基安替比林醌亚胺HO222ESPAS:N-乙基-N-(3-磺丙基)-间-茴香胺血清中的甘油三酯在脂蛋白脂肪酶的作用下水解成甘油和脂肪酸,甘油在甘油激酶的催化下和ATP一起反应生成甘油-3-磷酸和ADP,其中的产物甘油-3-磷酸在甘油磷酸氧化酶的氧化下产生磷酸二羟丙酮和过氧化物,最后过氧化物在过氧化物酶的催化下与色原底物4-氨基安替比林和4-氯酚反应生成红色化合物醌亚胺.由于醌亚胺在波长550nm处有最大吸收峰,所以在一定底物浓度范围内,550nm处吸光度的变化值与样本中甘油三酯的含量成正比.二、试剂1.试剂试剂来源：上海科华生物工程股份有限公司提供试剂瓶内主要成分：g甘油-3-磷酸氧化酶，抗坏血酸氧化酶，甘油激酶，ATP,4-氨基安替比林，脂蛋白脂肪酶，过氧化物酶，ESPAS试剂稳定性：试剂避光保存于2-8℃，若无污染，可稳定至失效期，本试剂有效期为12个月。试剂不可冰冻。试剂准备：试剂为即用式。2.校准要求输入理论因数或使用科华生物配套校准品。校准频次空白定标：每日需做试剂空白定标。三、操作按生化分析仪操作要求结合长征试剂说明书输入测定参数，并按校准、质量控制、样本测定的顺序进行常规测定。四、计算标准品校准项目后，测定室内质控，质控结果符合质控要求后方可测定样本。无需手工计算，每个标本的结果自动打印。五、质控程序1.建议采用朗道水平2(正常范围质控）和水平3（病理范围质控）两个水平的血清进行室内质控。2.可接受性判断质控物的检测值应在给定质控范围，或可以通过参加卫生部室间质评对实验室的运作情况进行系统评估。3.质控操作每日进行样本检测之前首先应进行质控操作，以考察系统的在控情况。如果检测结果符合质控要求则进行样本操作；如果不符合质控要求，则应重复质控操作，以排除可能发生的偶然误差；如果仍不符合质控要求，则应考虑质控品的重新准备、试剂的重新校准或更新、仪器的维护等。建议在样本的检测过程中和/或结束后再次进行质控操作，以考察样本的检测全过程的在控情况。六、操作性能1.可报告范围：本法对甘油三酯（TG）检测范围为0.05～11.3mmol/L。当样品测定值超过上限时，应将样品用9g/L氯化钠溶液作倍比稀释，重新测定，结果乘以稀释倍数。2.特异性/干扰：当样品中VC≤2000mg/L，胆红素浓度≤500mg/L，血红蛋白浓度≤5.00g/L，时对测定结果的影响可忽略。3.精密度:重复性CV%≤6%批间差≤15%七、参考范围0.35—1.8mmol/L八、危急值或警示对超出可报告范围的结果的处理：取0.1ml样品加0.4ml蒸馏水，再测定，结果乘以5。无危急值。九、临床意义正常人甘油三酯水平<2.3mmol/L(<200mg/dl),但高低易受生活条件影响，且其个体内差异及个体间差异均大于总胆固醇，还随年龄增加逐渐升高。当TG>4.5mmol/L(>400mg/dl)即可诊断为高甘油三酯血症。临床上，TG升...