第1页乙肝、HIV、梅毒实验室检验技术甘肃省妇幼保健院临床检验中心:赵翠生第2页综合产前检查服务+检测孕产妇参加产前检查服务检测前信息HBV检测梅毒检测HIV检测全血细胞计数和其它检测取血样2第3页梅毒的实验室检测3第4页梅毒•病原体为梅毒螺旋体,属于密螺旋体属,苍白密螺旋体苍白亚种(Treponemapallidumsubspeciespallidum)苍白亚种梅毒苍白螺旋体地方亚种地方性梅毒极细亚种雅司病密螺旋体属品他螺旋体品他病第5页梅毒血清学试验基本实验室设备检方法检测样本类型必要设备血清血浆全血RPR/TRUST√√水平旋转仪TPPA√√震荡仪ELISA√√酶标仪、洗板机POCT检测√√√无需特殊设备5第6页筛查时间梅毒检测方法•非梅毒螺旋体抗原血清学试验(RPR或TRUST检测)•梅毒螺旋体抗原血清学试验(TPPA、ELISA或梅毒快速检测)检测时间•第一次产检(孕早期)•或下一次产检时•如有必要,孕晚期再次检测•此前无检测结果,则在分娩时检测6第7页梅毒的实验室检测方法•显微镜检测法(诊断技术):(1)暗视野显微镜检查(2)镀银染色检查•血清学检测法(筛查技术)非梅毒螺旋体抗原血清试验:检测非特异性抗体:抗心磷脂抗体、即非特异性抗体、反应素梅毒螺旋体抗原血清试验:检测特异性梅毒螺旋体抗体第8页梅毒早期诊断的依据之一是病原学检测,即在组织或分泌物中检测到苍白螺旋体:–暗视野显微镜–镀银染色镜检梅毒检测技术8第9页非梅毒螺旋体抗原血清学试验•RPR(快速血浆反应素环状卡片试验)•TRUST(甲苯胺红不加热血清试验)•VDRL(性病研究实验室试验)梅毒螺旋体抗原血清学试验•TPPA(梅毒螺旋体颗粒凝集试验)•ELISA(酶联免疫吸附试验)•POCT(胶体金技术,快速检测、一站式检测)梅毒检测技术9第10页围产期梅毒检测方法特点用于诊断产检、临产及分娩的孕产妇是否感染梅毒梅毒血清学检测——筛查试验应具有的特点•具有较高的灵敏度和特异度•操作简单、容易获得、便宜•尽可能在“当日”获得结果10第11页非梅毒螺旋体抗原血清学试验梅毒螺旋体感染可产生非特异性抗体(非梅毒螺旋体抗体)非梅毒螺旋体抗体•又称之为反应素,是抗心磷脂等抗原的抗体•随菌体和宿主细胞的类脂质抗原量升高除梅毒外,其他医学情况会造成非梅毒螺旋体抗原血清学试验假阳性结果,包括结核、疟疾、妊娠和风湿关节炎、狼疮及硬皮病等自体免疫性疾病11第12页非梅毒螺旋体抗原血清学试验的特点非梅毒螺旋体抗原血清学试验:快速、简便、便宜敏感性和特异性较高硬下疳后1-2周变为阳性可用于–筛查样本–评估对治疗的反应–鉴别复燃还是再次感染12第13页确保非梅毒螺旋体抗原血清学试验质量的关键点1.按照标准操作程序(SOPs)进行操作2.推荐使用评价特性较好的试剂*3.按照统一的标准报告结果4.开展实验室质控(QC)和参加室间能力验证(PT)*由中国疾病预防控制中心性病中心国家参比实验室提供13第14页非梅毒螺旋体抗原血清学试验抗体滴度通常与疾病活动度有关•治疗后(可能几个月)非梅毒螺旋体抗原血清学试验通常转变为不反应•如果用同一种实验,相同试验滴度4倍变化(如从1:16下降到1:4或从1:8上升到1:32)为临床显著变化•有些病人,抗体滴度可始终处于较低水平,有时可持续终生(血清固定)注意:病人血清学监测应在同一个实验室使用同一种检测方法(RPR、TRUST)进行连续多次检测;RPR和TRUST方法均有效,但检测的滴度结果不能直接进行比较14第15页治疗后非梅毒螺旋体抗原血清学试验抗体滴度变化的临床意义一期梅毒和二期梅毒:成功治疗,抗体滴度应•3个月后下降2倍•6个月后下降4倍一期梅毒:1年后抗体滴度转阴二期梅毒:2年后抗体滴度转阴晚期梅毒:治疗后抗体滴度缓慢下降50%的病人2年后抗体滴度仍为阳性15第16页梅毒螺旋体抗原血清学试验梅毒螺旋体抗原血清学试验检测梅毒螺旋体抗原特异性抗体可用于确认非梅毒螺旋体抗原血清学试验的阳性结果,排除其假阳性阳性结果可持续存在,即使治疗后仍可为阳性。*梅毒螺旋体抗原血清学试验与疾病的活动度无关,不能用于鉴别现症感染还是既往感染,也不能用于判断疗效*一期梅毒治疗病人中,15%-25%可在2...