动物细胞培养和核移植技术植物组织培养植物体细胞杂交1.动物细胞培养2.核移植3.动物细胞融合4.单克隆抗体5.胚胎移植回顾:动物细胞工程常用的技术手段:植物细胞工程常用的技术手段有哪些?就是从动物机体中取出相关组织,将它分散成单细胞,然后,放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和繁殖。1、动物细胞培养概念:动物胚胎或幼龄动物的组织、器官胰蛋白酶剪碎单个细胞加培养液制成细胞悬浮液10代细胞部分细胞“癌变”,无限传代动物细胞培养不能最终培养成动物体50代细胞原代培养传代培养细胞贴壁剥离、分瓶细胞株细胞细胞系2.动物细胞培养过程:增殖能力强,分裂旺盛,分化程度低,容易培养去掉组织间蛋白3、动物细胞培养过程中几个重要的概念a.细胞贴壁:悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上(单层)。要求:培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、易于贴附。b.接触抑制:当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞就会停止分裂增殖,这种现象称为细胞的接触抑制。动物细胞培养特点:贴壁生长、接触抑制:c.原代培养(primaryculture)从动物机体中取出组织剪碎加胰蛋白酶细胞游离加培养液将细胞接种到培养瓶内培养(1--2天换一次培养液)细胞贴壁生长长成单层细胞初次培养d.传代培养(subculture)当原代培养的细胞生长停止,这时如果要使细胞继续生长,就要及时用胰蛋白酶等,使细胞从瓶壁上解离下来,然后加入新的培养液,将细胞分离稀释,并从原培养瓶内转接到新的培养瓶内,这个过程称传代培养e.细胞株:从原代培养细胞群中筛选出进行传代培养的细胞,能传到40-50代,其遗传物质没有发生变化。f.细胞系:传到40-50代后有部分细胞遗传物质发生了变化,带有癌变的特点,可能在培养条件下无限制的传代下去,这种传代细胞称为细胞系。细胞株和细胞系的区别:细胞系的遗传物质改变,具有癌细胞的特点,失去接触抑制,容易传代培养。细胞悬浮液10代细胞50代细胞无限传代原代培养传代培养细胞株细胞系知识点小结:各个新名词之间的联系多数组织细胞固定在表面生长和分裂。随细胞增多,细胞就会停止分裂增殖遗传物质改变1、无菌、无毒的环境(添加一定量的抗生素,定期更换培养液)2、营养(葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清、微量元素等)3、温度和PH温度36.5+0.5度,pH7.2~7.44、气体环境O2和CO2(95%空气和5%CO2)4、动物细胞培养条件保证细胞顺利的生长增殖离体培养的细胞对微生物和有毒物质没有防御能力能否用胃蛋白酶代替胰蛋白酶?5、动物细胞培养技术的应用(1)生产蛋白生物制品:病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等。(3)用于检测有毒物质(2)获得大量自身的皮肤细胞,用于植皮。(4)用于生理、病理、药理等方面的研究,为治疗和预防疾病提供理论依据(5)作为基因工程的受体细胞获得细胞细胞的全能性细胞株、细胞系植物体培养结果或细胞分泌蛋白快速繁殖、培育无病毒植株等培养目的葡萄糖、动物血清促生长因子蔗糖、植物激素培养基特有成分液体培养基固体培养基培养基性质细胞增殖原理动物细胞培养植物组织培养比较项目6、植物细胞和动物细胞培养的比较本节内容小结1、动物细胞培养过程涉及的概念细胞贴壁、细胞的接触抑制、原代培养、传代培养、细胞株、细胞系3、植物细胞和动物细胞培养的比较4、动物细胞培养技术的应用2、动物细胞培养条件((二二))动物体细胞核移植动物体细胞核移植技术和克隆动物技术和克隆动物问题讨论问题讨论11、某植物非常具有观赏价值,你采取什么方法来、某植物非常具有观赏价值,你采取什么方法来繁殖后代,使它们继承该植物的全部优良性状?繁殖后代,使它们继承该植物的全部优良性状?2、2、19971997年,美国威斯康星州的一个奶牛场有一年,美国威斯康星州的一个奶牛场有一头名叫卢辛达的奶牛,年产奶量为头名叫卢辛达的奶牛,年产奶量为30.8t30.8t,创造了,创造了世界奶牛产量的最高记录。目前世界各国高产牛奶世界奶牛产量的最高记录。目前世界各国高产牛奶场的奶牛,平均每年产量为十几吨,而我国平均水场的奶牛,平均每年产量为十几吨,而我国平均水平仅有平仅有33--44吨。你能想办法繁殖卢辛达的后代,吨...