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水温骤降后凡纳滨对虾血清中NO、NOS水平及对副溶血弧菌的敏感性[1]VIP免费

水温骤降后凡纳滨对虾血清中NO、NOS水平及对副溶血弧菌的敏感性[1]_第1页
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第21卷第1期2006年3月大连水产学院学报JOURNALOFDALIANFISHERIESUNIVERSITYV01.21No.1M.20O6文章编号:1000—9957(2006)O1-OO46—05水温骤降后凡纳滨对虾血清中NO、NOS水平及对副溶血弧菌的敏感性朱宏友,王广军,余德光,谢骏(1.中国水产科学研究院珠江水产研究所,广州510380;2._ktg*产大学生命科学与技术学院,上海200090)摘要:测定了水温骤降后(A组(25---,22~C)、B组(25—19~C)、c组(25—16~C)、对照组(25℃))6、24h凡纳滨对虾Penaeusvannamei血清中一氧化氮(NO)的浓度、一氧化氮合成酶(IIi-tricoxidesynthase,NOS)的活性以及溶菌酶活力的变化,并在水温变化后24h用副溶血弧菌Vibrioparahaemolytictts对对虾进行人工感染,以评价凡纳滨对虾对副溶血弧菌的敏感性。结果表明,水温骤降后6h,各试验组对虾血清中NO浓度、NOS活性、溶菌酶活力均与对照组差异不显著(P>O.05)。水温骤降后24h,B组对虾血清中NO浓度显著高于对照组(P<0.05),A、c两组与对照组差异不显著(P>0.05);B组对虾血清中NOS的活性显著高于对照组(P<0.05),c组显著低于对照组(P<0.05)。A组与对照组差异不显著(P>0.05);各试验组对虾血清中的溶菌酶活力与对照组差异不显著(P>0.05);用副溶血弧菌人工感染对虾的死亡率c组为58.3%,与对照组(33.3%)存在显著差异(P<0.05)。这说明水温大幅度急剧下降后,凡纳滨对虾血清中的NOS活性、溶菌酶活力下降。因而导致凡纳滨对虾对副溶血弧菌的敏感性升高。关键词:凡纳滨对虾;水温变化;一氧化氮;一氧化氮合成酶中图分类号:Q945.4文献标识码:A对虾在养殖过程中可能会面临着多方面的环境胁迫(水质恶化、个体问的竞争、高密度拥挤、水温变化等),由此而引发其机体的应激反应,这虽是一种保护性反应,但若长期处于应激状态下,对虾机体的免疫功能会受到抑制⋯。在免疫系统中,由一氧化氮合成酶(NOS)催化产生的一氧化氮(NO)在生物抵抗疾病和免疫调控方面具有非常重要的作用“】,并且NOS能够作为反映对虾健康状况的有效指标J。国内外有关环境胁迫对对虾免疫功能的影响已有报道、】,而水温骤降对对虾免疫功能方面的研究尚未见报道。作者以NO和NOS为指标,通过测定其在凡纳滨对虾Penaeus犯一namei体内的变化,来研究水温变化对对虾非特异性免疫功能的影响,以期为对虾的疾病预防提供科学依据。1材料与方法1.1试验材料试验用凡纳滨对虾体长为(12.23士1.22)cm,体重为(13.225:3.24)g,购于深圳市农科中心基地,于昼夜充气的水泥池中暂养1周,正常投喂饲料,选择健康的凡纳滨对虾进行试验。试验用溶壁微球菌冻干粉、NO和NOS检测试剂盒购于南京建成生物工程研究所,副溶血弧菌m砌parahaemolyticus由珠江水产研究所鱼病室提供。收稿日期:2005-03-30基金项目:广东省自然科学基金资助项目(031818)(05011783)作者简介:朱宏友(1974一),男。硕士。E-mail,zhuhyO423@163.c0In通讯作者:谢骏(1965一)。男,博士,研究员。E—mm:~joo7@tom.tom维普资讯http://www.cqvip.com第1期朱宏友,等:水温骤降后凡纳滨对虾血清中NO、NOS水平及对副溶血弧菌的敏感性471.2试验方法设置3个试验组的水温变化幅度分别为:A组(25--.22~C)、B组(25_+l9c【=)、c组(25_+16~C),D组(25~C)为对照组。各梯度用海水冰块调节温度,每组设3个重复。试验在300L的塑料桶中进行,每桶放30只凡纳滨对虾。于试验后6、24h分别采集各组的样品。整个试验过程连续充气,正常投喂对虾配合饲料,试验期间盐度为30。1.3血清的制备用1mL一次性无菌注射器从对虾第四步足基部采集血淋巴,于冰箱(4~C)中过夜,在4~C下以4000r/min离心5rain,吸取上清液后两两混合,并置于冰箱(一20~C)中备用。24h后各组剩余对虾用于人工感染试验。1.4检测方法NO化学性质活泼,在生物体内代谢很快转化为NO;和NO:-,而NO;又进一步转化为NO;。因此可利用硝酸还原酶的特异性,将NO;还原为NO;,再通过显色深浅测定NO的浓度。NOS能催化L一精氨酸生成NO,生成的NO与亲核物质反应生成有色化合物,在530nm波长下测定其吸光度,根据吸光度大小计算NOS的活性。以溶壁微球菌冻干粉为底物,参照Hultmark等的方法,略有...

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